background image

быть представлены: посевная доза, метод снятия клеток, кратность рассева, 
частота пассирования. 

Для изучения морфологии клеток применяют также метод электронной 

микроскопии,  высокая  разрешающая  способность  которого  позволяет 
выявлять  дифференцировку  клеток,  различать  их  тончайшие  структуры  и 
наличие многочисленных клеточных органелл. 

Определение видовой идентичности 

В  процессе  пассирования  клеточных  культур  возможна  видовая  и 

внутривидовая  контаминация  одних  клеточных  линий  другими.  Разработка 
методов  идентификации  клеточных  культур  предполагает  определение  и 
изучение  стабильности  клеточных  признаков.  С  этой  целью  разработаны  и 
применяются методы электрофореза, кариологического анализа хромосом и 
молекулярно-генетические методы (ПЦР).  

Основными  биохимическими  маркерами,  специфичными  для  данного 

вида  донора,  позволяющими  определять  внутривидовую  и  видовую 
контаминацию  клеточных  культур,  является  анализ  полиморфизма 
изоферментов,  обладающих  одинаковой  специфичностью  к  субстрату. 
Такими изоферментами являются глюкозо-6-фосфат дегидрогеназы (Г6ФДГ), 
лактат-дегидрогеназы (ЛДГ), нуклеозидфосфорилаза (НФ) и др. 

Метод  основан  на  сравнении  электрофореграммы  изоферментов 

исследуемой  линии  клеток  с  электрофореграммой  изоферментов  клеток 
известного  вида  донора.  Каждому  виду  соответствует  определенный  набор 
изоферментов.  Совпадение  электрофоретической  подвижности  полос  в 
опытном  и  контрольном  (стандартном)  образцах  позволяет  заключить,  что 
исследуемые клетки принадлежит данному виду.  

Изоферменты  можно  выявить  при  помощи  электрофореза  в 

полиакриламидном, агарозном гелях или на пленках из ацетата целлюлозы. В 
настоящее  время  используют  в  основном  агарозные  и  полиакриламидные 
гели.  Различные  изоферменты  мигрируют  с  различной  скоростью  и  по 
окончании  электрофореза  могут  быть  выявлены  окрашиванием  с 

2842