Из  числа  учитываемых  эритроцитов  подсчитывают  процент 

эритроцитов (

К 

%), имеющих на своей поверхности прилипшие микробы. 

Кроме  того,  подсчитывают  индекс  адгезивности  микроба  (ИАМ)  – 

среднее количество микробных клеток на одном эритроците, участвующем в 
адгезивном процессе, по формуле: 

ИАМ = (СПА 100 %) / 

К

,  

где СПА – средний показатель адгезии испытуемого микроба; 

К

  –  количество  эритроцитов,  имеющих  на  своей  поверхности 

прилипшие микробы. 

Учет  результатов

.  Микроорганизмы  считают  неадгезивными  при 

ИАМ  от  1,00  до  1,75;  низкоадгезивными  –  ИАМ  от  1,76  до  2,49; 
среднеадгезивными – ИАМ от 2,50 до 3,99 и высокоадгезивными – при ИАМ 
> 4,00. 

2.

 

Метод  определения  адгезивности  пробиотических  штаммов  к 

эпителиальным клеткам кишечника крыс или мышей. 

Адгезивность штаммов 

изучают в системе 

in vitro

 на эпителиальных клетках тонкой и толстой кишки 

крыс  линии  Фишер  или  любой  другой  линии,  или  на  беспородных  белых 
мышах.  Крыс  или  мышей  умерщвляют  углекислым  газом.  Из  кишечника 
погибших  животных  выделяют  кусочки  размером  5×5  мм,  тщательно 
отмывают  их  от  слизи  и  содержимого  с  помощью  ЗФР.  После  этого  из 
кусочков  слизистой  кишечника  на  вибраторе  модели  ВПП  получают 
эпителиальные клетки. 

Полученные  эпителиоциты  дважды  отмывают  охлажденным  ЗФР  (pH 

7,2)  при  центрифугировании  (800  об/мин  по  10  мин).  После  определения 
исходной  концентрации  клеток  с  помощью  камеры  Горяева  при  световой 
микроскопии ее доводят до 2 ∙ 10

6 

клеток/мл с помощью ЗФР. Одновременно 

с  подготовкой  клеток  эпителия  готовят  суспензию  испытуемой 
пробиотической культуры в концентрации 2

 

∙

10

9

 КОЕ/мл. 

При проведении эксперимента на 0,5 мл взвеси эпителиальных клеток 

наносят  0,5  мл  взвеси  бактериальной  культуры  указанной  концентрации. 

Предыдущая <  | 2886  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF