Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Определение белка без предварительного осаждения проводят в

соответствии с методикой, указанной в ОФС «Определение белка» (метод
Лоури, метод А). В качестве контрольного раствора используют 1 мл воды
очищенной или буферного раствора, указанного в фармакопейной статье или
нормативной документации.

Содержание белка в препарате рассчитывают по калибровочному

графику.

Построение калибровочного графика

. К 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 мл

стандартного  раствора,  добавляют  воду  очищенную  до  1  мл  (концентрация
белка:  0,04;  0,08;  0,12;  0,16  мг/мл  соответственно),  перемешивают  и  далее
проводят определение по методу А (без предварительного осаждения белка)
в соответствии с ОФС «Определение белка» (Метод Лоури, метод А).

Строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс количество

белка в мг, а по оси ординат – среднее значение оптической плотности.
Калибровочный график воспроизводят при каждом анализе.

Примечания

Испытуемый раствор. 1 мл испытуемого раствора, содержащий от 0,04

до 0,16 мг/мл белка.

Стандартный раствор

. Стандартный образец (СО) с аттестованным

значением содержания белка разводят до концентрации 0,2 мг/мл в

соответствии с инструкцией по применению.

В случае отсутствия СО, стандартный раствор может быть

приготовлен, как указано в ОФС «Определение белка».

Метод II (с предварительным осаждением белка)

Метод рекомендован для БЛП, содержащих компоненты, влияющие на

результаты анализа (тиомерсал, ароматические аминокислоты, сахара и т.п.)

К 1 мл испытуемого раствора прибавляют 1 мл 20 % раствора

трихлоруксусной кислоты и перемешивают на вихревой мешалке. Пробу
выдерживают при температуре от 2 до 8

С в течение 18 - 20 ч. Осадок

отделяют центрифугированием при температуре 4 - 8

С при 2000 об/мин в

течение 30 мин, промывают 1 мл 10 % раствора трихлоруксусной кислоты и