background image

центрифугируют в аналогичных условиях. Надосадочную жидкость удаляют, 
осадок растворяют в 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, доводят объем 
раствора  водой  до  1  мл  и  перемешивают.  К  0,5  мл  полученного  раствора 
прибавляют  0,5  мл  воды  очищенной,  перемешивают  на  вихревой  мешалке, 
прибавляют  5 мл  реактива  В,  вновь  перемешивают на  вихревой  мешалке и 
выдерживают  при  комнатной  температуре  в  течение  10  мин.  Далее  анализ 
проводят  по  методу  В  в  соответствии  с  ОФС  «Определение  белка»  (метод 
Лоури, метод В). 

Примечания 

     Испытуемый раствор. 1 мл испытуемого раствора, содержащий от 0,1 

до 0,13 мг/мл белка. 

     Приготовление  реактива  В  указано  в  ОФС  «Определение  белка» 

(Метод Лоури, метод А).

   

     Приготовление  10  %  и  20  %  растворов  трихлоруксусной  кислоты 

(ТХУ

)

.  Растворы  готовят  соответствующим  разведением  80  %  раствора 

ТХУ. 

     Приготовление 80 % раствора (ТХУ). Растворяют 150 г ТХУ в 100 мл 

воды  очищенной.  Титруют  1  мл  полученного  раствора  1  М  раствором 

натрия гидроксида, (индикатор фенолфталеин).

  

 

Концентрацию  ТХУ  (Х),  выраженную  в  процентах,  рассчитывают  по 

формуле: 

 

  Х = 

а

 

 0,1634 

 100 = 

а

 

 16,34, 

 

где: 

а

  -  объем  1М  раствора  натрия  гидроксида,  пошедший  на 

титрование испытуемого раствора, мл; 

0,1634  -  количество  ТХУ,  соответствующее  1  мл  1  М  раствора 

натрия гидроксида, г.  

Раствор  ТХУ  разводят  в  соответствии  с  полученными  данными  до 

концентрации  80  %.  Титр  раствора  проверяют  не  реже  1  раза  в  мес.  При 

изменении установленной концентрации раствор готовят заново.

 

     Приготовление  фосфорномолибденово-вольфрамового  реактива.  Перед 

использованием 2 N фосфорномолибденово-вольфрамовый реактив  

(2  N  коммерческий  реактив  Фолина-Чокальтеу)  разводят  в  2  раза  водой 

очищенной  или  готовят  реактив  в  соответствии  с  ОФС  «Реактивы. 

Индикаторы».  

 

Метод  III  (для  сорбированных  препаратов  с  содержанием  белка 

0,02 - 0,16 мг/мл)  

Предыдущая <  | 2953  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF