Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Для подтверждения наличия микоплазм используют плотную

питательную среду, содержащую 1,3 % агара (среда Каган плотная).

Все среды Каган для выделения и культивирования микоплазм готовят

на одной основе

−

среде Каган жидкой

, в состав которой входят:

•

Гидролизат бычьего сердца жидкий

−

200 мл (сухой

−

20 г);

•

Мясная вода

−

400 мл или

Мясной экстракт

−

13,0 г (3,0–3,5 % сухих веществ на 1 л среды);

•

Дрожжевой экстракт

(экстракт хлебопекарных дрожжей)

−

5,0 г (1,5 г

сухих веществ на 1,0 л среды);

•

Натрия хлорид

−

5,0 г;

•

Вода очищенная

−

до 1,0 л.

Значение рН готовой среды после стерилизации

(

7,8±0,1).

Для приготовления полужидкой среды, содержащей 0,3% агара, вносят

3,0 г агара микробиологического на 1,0л среды. Для приготовления плотной

среды, содержащей 1,3 % агара, вносят 13,0 г агара микробиологического на

1,0 л среды.

Приготовление питательных сред. Смешивают гидролизат бычьего

сердца, мясной экстракт (или мясную воду), экстракт хлебопекарных

дрожжей, натрия хлорид и воду очищенную. Для приготовления полужидкой

или плотной среды дополнительно вносят 3,0 г или 13,0 г агара

соответственно. Доводят рН среды до (8,1 ± 0,1) 10 % раствором натрия

гидроксида. Среду нагревают до кипения, кипятят 2-3 мин и при

необходимости фильтруют. С помощью 5 % раствора хлористоводородной

кислоты устанавливают рН (7,8 ± 0,1).

Среды разливают во флаконы и стерилизуют автоклавированием при

температуре 110

С в течение 30 мин. Готовые среды хранят при температуре

от 2 до 8

С не более 4 мес.

Стерильность питательных сред. Каждая партия питательной среды

должна быть проверена на стерильность. Образцы сред в количестве

определенном в соответствии с ОФС 1.1.0004.15. «Отбор проб» инкубируют

при температуре (32,5 ± 2,5)

С и (22,5 ± 2,5)

С в течение не менее 14 сут .

Рост микроорганизмов должен отсутствовать.

Подготовка сред для проведения испытания.
Перед применением полужидкую среду, содержащую 0,3 % агара, и

плотную среды, содержащей 1,3 % агара, нагревают на водяной бане до