background image

При отсутствии характерной для микоплазм флюоресценции считают, 

что  контаминация  микоплазмами  не  обнаружена  и  испытуемый  образец 
удовлетворяет требованиям испытания. 

Обнаружение 

характерной 

для 

микоплазм 

флюоресценции 

свидетельствует  о  контаминации  испытуемого  образца  микоплазмами  и 
образец считается не соответствующим требованиям испытания. 

Результаты  испытания  будут  считаться  недостоверными,  если  в 

образцах  положительного  контроля  микоплазмы  не  обнаружены,  а  
обнаружены  в  отрицательном  контроле.  В  случае  получения  сомнительных 
результатов следует проводить повторные испытания. 

Примечания 
1.

 

Приготовление красителя Hoechst-33258 (Bisbenzimide) 

А. Приготовление концентрированного раствора

. В 100 мл стерильной воды 

очищенной  растворяют  5,0  мг  красителя.  Раствор  хранят  в  защищенном  от 

света месте при температуре от 2 до 8 

о

С не более 1 года. 

Б.  Приготовление  основного  раствора.

  К  100  мл  стерильной  воды 

очищенной  добавляют  0,5  мл  концентрированного  раствора  красителя  и 

перемешивают. Раствор готовят перед использованием. 

В.  Приготовление  рабочего  раствора.

  Основной  раствор  красителя 

смешивают  с  раствором  Хенкса  без  индикатора  в  соотношении  1:9  и 

немедленно используют для окраски испытуемых образцов. Рабочий раствор 

хранению не подлежит. 

 
2. Подготовка люминесцентного микроскопа.   
Проводят подготовку люминесцентного микроскопа к работе согласно 

Руководству по эксплуатации. Просматривают препараты в люминесцентном 

микроскопе  при  увеличении  ок.10×,  об.90×  (масляная  иммерсия)  или 

об.70×/85× (водная иммерсия). 

3.  Подготовка  предметных  стекол.  Предметные  стекла  промывают  в 

проточной водопроводной воде в течение 10–15мин, затем кипятят 5–7 мин в 

воде  очищенной,  протирают  стерильной  салфеткой  и  помещают  на  1  сут  в 

смесь Никифорова (смесь равных объемов 96

о

 этилового спирта и эфира для 

наркоза).  Стекла  извлекают  из  смеси  Никифорова  с  помощью  пинцета, 

протирают стерильной салфеткой и стерилизуют в течение (30 ± 2) мин при 

температуре (120 ± 2) 

о 

С. 

 

 

3008