background image

Для подтверждения наличия выраженных отличий в пептидных картах 

может быть использована охарактеризованная по составу смесь, включающая 
стандартный  образец  изучаемого  пептида  и  пептид,  отличный  от  него  по 
структуре.  Использование  охарактеризованных  по  составу  смесей  наиболее 
показательны  в  случае,  если  пики  (реперные  пики)  отличных  по  составу 
пептидов  элюируются  в  области  худшего  разделения  пиков  на  пептидной 
карте 

В  качестве  пептида,  отличного  по  структуре  от  испытуемого  образца 

может быть использован пептид принципиально иной структуры, например, 
производимый  на  одной  производственной  площадке  и  сходный  по 
молекулярной  массе  с  испытуемым  пептидом  или  вариант  испытуемого 
пептида,  отличный  от  него  в  определённых  участках  первичной 
последовательности (вариабельный пептид) или пептид близкой структуры, 
но имеющий выраженные отличия в небелковой части молекулы (например, 
пегилированный и непегилированный варианты пептида).  

Специфичность  методики  так  же  дополнительно  оценивается 

статистической обработкой соотношений анализируемых параметров пиков и 
хроматографического  профиля  смеси  1:1  (об/об)  продуктов  гидролиза 
испытуемого образца и стандартного образца.  

Специфичность  методики  и  идентичность  анализируемого  образца 

пептида  подтверждается,  если  все  пики  продуктов  гидролиза  изучаемого 
пептида  и  его  стандартного  образца  имеют  аналогичные  времена 
удерживания  и  соотношения  оцениваемых  параметров  пиков.  Если  пики, 
которые  изначально  характеризовались  значительно  различающимися 
временами удерживания, затем в смеси 1:1 обнаруживались единым пиком, 
изначально  выявленное  различие  является  показателем  нестабильности 
выбранной  системы  разделения  пептидов.  Однако  если  в  смеси  1:1 
наблюдаются  разделенные  пики,  это  является  доказательством  наличия 
различных пептидов в каждом из пиков. Если пик в смеси 1:1 существенно 

Предыдущая <  | 3049  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF