Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Напряжённость электрического поля

При оценке напряженности электрического поля для горизонтального

электрофореза принято пренебрегать конкретной геометрией камеры и
измерять расстояние непосредственно между электродами.

Для аналитических электрофорезов приемлемое качество сохраняется при

напряженности электрического поля до 6 В/см.

ДНК особенно легко теряет бромистый этидий при повышенной

температуре.  Проведение  электрофореза  при  высоком  напряжении
электрического  поля  может  достаточно  сильно  нагреть  гель.  Но  даже  при
невысоких значениях напряжения в электрическом поле происходит выделение
тепла,  поэтому  следует  обеспечивать  теплоотвод  и  стабильность
температурного  режима  (комнатная  температура)  с  целью  исключения
изменений  вязкости  геля,  проводимости  и  скорости  потока  и,  следовательно,
искажения зон анализируемых компонентов.

Примечания

Приготовление трис-боратного буферного раствора pH 8,0. В мерную

колбу вместимостью 1 л вносят 10,8 г трис(гидроксиметил)аминометан, 5,5 г

борной кислоты, 4 мл 0,05 М раствора ЭДТА pH 8.0 и 700 мл воды очищенной,

перемешивают, доводят объем раствора водой очищенной до метки и вновь

перемешивают.

Приготовление буферного раствора для внесения pH 8,0. В мерную колбу

вместимостью 25 мл вносят 1,25 мл 0,5 % раствора натрия додецилсульфата, 5

мл 0,1 М раствора ЭДТА pH 8.0, 12,5 мл глицерина, 6,25 мл воды очищенной и

тщательно перемешивают. Перед использованием отбирают необходимое

количество буферного раствора, разводят в 10 раз водой очищенной, добавляют

выбранный краситель (например, бромфеноловый синий) до необходимой

концентрации, указанной в нормативной документации и перемешивают.