background image

при  температуре  37°С  согласно  инструкции  к  набору.  Для  каждого 
разведения трижды определяют время образования сгустка. По полученным 
результатам в логарифмических координатах строят калибровочный график 
зависимости времени образования сгустка от концентрации фибриногена. 

Готовят 2 разведения испытуемого образца с концентрацией ниже 100 

мг/дцл.  Для  каждого  разведения  время  образования  сгустка  определяют 
трижды.  Количество  фибриногена  в  каждом  разведении  определяют  по 
калибровочному графику. 

Фактор II (тромбин) 

1.

 

Клоттинговый метод 

Определение  активности  фактора  II  проводят  с  использованием  в 

качестве субстрата человеческой плазмы, дефицитной по фактору II. Процесс 
свертывания активируется добавлением к смеси кальция тромбопластина. 

Для  разведения  стандарта  и  препаратов  используют  NaCl-

имидазоловый  буфер  pH  7,3±0,1  с  добавлением  0,1%  бычьего  или 
человеческого  альбумина.  Для построения  калибровочного  графика  готовят 
серию  последовательных  разведений  стандарта  фактора  II  в  интервале 
активности  от  0,3  до  1  МЕ/мл.  Препарат  разводят  до  концентрации  менее 
1 МЕ/мл.  Анализируют  3  разведения  препарата.  Для  каждого  образца 
измерение  времени  свертывания  проводят  минимум  2  раза.  Измерение 
проводят в течение 1 ч после разведения препарата. 

Анализ проводят при температуре (37±0,5)°С. В пластиковую пробирку 

вносят  50  мкл  плазмы,  дефицитной  по  фактору  II,  и  50  мкл  разведения 
стандарта или препарата. Смесь инкубируют при (37 ± 0,5)°С в течение 120 – 
240 с. Время свертывания определяют с момента добавления к смеси 200 мкл 
предварительно  нагретого  до  температуры  (37±0,5)°С  кальция 
тромбопластина.  В  зависимости  от  техники  постановки  анализа  объемы 
реагентов могут варьироваться в соответствующей пропорции. 

Калибровочный  график  строят  в  полулогарифмических  координатах. 

По логарифмической оси абсцисс откладывают значения активности фактора 

Предыдущая <  | 3138  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF