Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

образца определяют двухкратно, полученные значения используют для
построения калибровочного графика. Испытуемые образцы определяют
трехкратно.

Испытания проводят в ручном режиме с использованием микропланшет

и спектрофотометра, поддерживающего температуру в диапазоне (37±0,5)°C
или в автоматическом режиме с использованием коагулометра.

Для проведения испытаний в ручном режиме в лунки микропланшета

вносят по 25 мкл каждого разведения испытуемого препарата или
стандартного образца. В каждую лунку прибавляют по 125 мкл буфера для
разведения, по 25 мкл экарина и инкубируют при температуре (37±0,5)°C в
течение 2 мин. По истечении времени инкубации в каждую лунку вносят по
25 мкл хромогенного субстрата фактора IIа.

Определяют скорость изменения оптической плотности при длине

волны 405 нм непрерывно в течение 3 мин и рассчитывают среднюю
скорость изменения оптической плотности (∆

/мин).

Если непрерывное измерение оптической плотности невозможно,

определяют оптическую плотность при длине волны 405 нм через
последовательные интервалы времени (например, через 40 с) и строят график
зависимости оптической плотности от времени и рассчитывают ∆

/мин как

угол наклона прямой. Из значений ∆

/мин каждого индивидуального

разведения стандартного образца и испытуемого препарата рассчитывают
активность испытуемого препарата.

Тест на отсутствие тромбина

Определение проводят коагулометрическим методом.
Для испытаний готовят восстановленный в соответствии с инструкцией

раствор препарата. При наличии в препарате гепарина его нейтрализуют
добавлением протамина сульфата из расчета 10 мкг протамина сульфата на
1 МЕ гепарина.

Приготовление раствора фибриногена