background image

образца  определяют  двухкратно,  полученные  значения  используют  для 
построения  калибровочного  графика.  Испытуемые  образцы  определяют 
трехкратно. 

Испытания проводят в ручном режиме с использованием микропланшет 

и  спектрофотометра,  поддерживающего  температуру  в  диапазоне  (37±0,5)°C 
или в автоматическом режиме с использованием коагулометра. 

Для  проведения  испытаний  в  ручном  режиме  в  лунки  микропланшета 

вносят  по  25  мкл  каждого  разведения  испытуемого  препарата  или 
стандартного образца. В каждую лунку прибавляют по 125 мкл буфера для 
разведения, по 25 мкл экарина и инкубируют при температуре (37±0,5)°C в 
течение 2 мин. По истечении времени инкубации в каждую лунку вносят по 
25 мкл хромогенного субстрата фактора IIа.  

Определяют  скорость  изменения  оптической  плотности  при  длине 

волны  405  нм  непрерывно  в  течение  3  мин  и  рассчитывают  среднюю 
скорость изменения оптической плотности (∆

А

/мин).  

Если  непрерывное  измерение  оптической  плотности  невозможно, 

определяют  оптическую  плотность  при  длине  волны  405  нм  через 
последовательные интервалы времени (например, через 40 с) и строят график 
зависимости оптической плотности от  времени и рассчитывают  ∆

А

/мин  как 

угол  наклона  прямой.  Из  значений  ∆

А

/мин  каждого  индивидуального 

разведения  стандартного  образца  и  испытуемого  препарата  рассчитывают 
активность испытуемого препарата. 

3.

 

Тест на отсутствие тромбина 

Определение проводят коагулометрическим методом. 
Для испытаний готовят восстановленный в соответствии с инструкцией 

раствор  препарата.  При  наличии  в  препарате  гепарина  его  нейтрализуют 
добавлением протамина сульфата из расчета 10 мкг протамина сульфата на 
1 МЕ гепарина. 

Приготовление раствора фибриногена 

3140