background image

Количественное определение фактора VIII проводят с помощью набора 

реактивов, в котором фактор VIII является кофактором для фактора IХа при 
активации фактора Х в форму Ха, расщепляющего хромогенный субстрат. 

Принцип метода 

В  присутствии  ионов  Са

2+

  и  фосфолипидов  фактор  Х  под  действием 

фактора  IХа  активируется  в  Ха.  При  избытке  фактора  Х  и  оптимальных 
количеств Са

2+

, фосфолипидов и фактора IХа скорость активации фактора Х 

линейно  зависит  от  количества  фактора  VIII.  Фактор  Ха  гидролизует 
хромогенный субстрат S-2765 (N-a-Z-DArg-Gly-Arg-pNA) с высвобождением 
хромогенной 

группы 

pNA, 

окраску 

которой 

регистрируют 

спектрофотометрически  при  405  нм.  Количество  образовавшегося  фактора 
Ха  и,  следовательно,  интенсивность  окрашивания,  пропорциональны 
активности фактора VIII в образце.

 

Набор реактивов для определения активности фактора VIII стабилен в 

течение срока, указанного производителем при температуре хранения от 2 до 
8

о 

С. 

Набор реактивов содержит: 
1.

 

7,7  мг  хромогена  S-2765  с  добавкой  синтетического  ингибитора 
тромбина  I-2581.  Реактив  восстанавливают  в  6,0  мл  стерильной 
воды  для  инъекций.  Восстановленный  раствор  стабилен  в  течение 
1 мес  при  температуре  от  2  до  8°С.  Перед  использованием 
нагревают до температуры 37°С. 

2.

 

Реактив бычьих факторов: 0,3 Ед фактора IХ, 2,7 МЕ фактора Х и 
1 NIH  Ед  тромбина,  лиофилизированных  в  присутствии  40  ммоль 
СаCl

2

 и 0,2 ммоль фосфолипидов. Реактив восстанавливают в 2,0 мл 

стерильной воды для инъекций. Восстановленный раствор стабилен 
в течение 12 ч при температуре от 2 до 8

о

С, 2 нед при температуре 

минус  30 

о

С  и  1  мес  при  температуре  минус  80

о

С.  Не  следует 

хранить  при  температуре  минус  20

о

С.  Перед  использованием 

нагревают до температуры 37

о

С. 

3145