Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Количественное определение фактора VIII проводят с помощью набора

реактивов, в котором фактор VIII является кофактором для фактора IХа при
активации фактора Х в форму Ха, расщепляющего хромогенный субстрат.

Принцип метода

В присутствии ионов Са

и фосфолипидов фактор Х под действием

фактора IХа активируется в Ха. При избытке фактора Х и оптимальных
количеств Са

, фосфолипидов и фактора IХа скорость активации фактора Х

линейно зависит от количества фактора VIII. Фактор Ха гидролизует
хромогенный субстрат S-2765 (N-a-Z-DArg-Gly-Arg-pNA) с высвобождением
хромогенной

группы

pNA,

окраску

которой

регистрируют

спектрофотометрически при 405 нм. Количество образовавшегося фактора
Ха и, следовательно, интенсивность окрашивания, пропорциональны
активности фактора VIII в образце.

Набор реактивов для определения активности фактора VIII стабилен в

течение срока, указанного производителем при температуре хранения от 2 до
8

С.

Набор реактивов содержит:
1.

7,7  мг  хромогена  S-2765  с  добавкой  синтетического  ингибитора
тромбина  I-2581.  Реактив  восстанавливают  в  6,0  мл  стерильной
воды  для  инъекций.  Восстановленный  раствор  стабилен  в  течение
1 мес  при  температуре  от  2  до  8°С.  Перед  использованием
нагревают до температуры 37°С.

Реактив бычьих факторов: 0,3 Ед фактора IХ, 2,7 МЕ фактора Х и
1 NIH Ед тромбина, лиофилизированных в присутствии 40 ммоль
СаCl

и 0,2 ммоль фосфолипидов. Реактив восстанавливают в 2,0 мл

стерильной воды для инъекций. Восстановленный раствор стабилен
в течение 12 ч при температуре от 2 до 8

С, 2 нед при температуре

минус 30

С и 1 мес при температуре минус 80

С. Не следует

хранить при температуре минус 20

С. Перед использованием

нагревают до температуры 37

С.