background image

405  нм  и  в  линейных  координатах  строят  калибровочный  график 
зависимости абсорбции от активности ATIII. 

Готовят  2  разведения  исследуемого  образца  с  ориентировочной 

активностью  ATIII  менее  1,0  МЕ/мл.  Определение  активности  ATIII  в 
испытуемых образцах проводят при температуре 37°С согласно указаниям в 
инструкции к набору. Активность ATIII в испытуемых разведениях находят 
по  калибровочному  графику.  Активность  ATIII  в  исследуемом  образце 
определяют как: 

k

A

A

x

=

где: 

A

x

 – активность ATIII в соответствующем разведении; 

k

 – разведение образца. 

 

Количественное определение гепарина 

1.

 

Клоттинговый метод 

Метод  основан  на  способности  гепарина  за  счет  ингибирования  ряда 

факторов удлинять время свертывания нормальной плазмы. 

Для  проведения  анализа  используют  нормальную  человеческую 

плазму,  стандартный  образец  гепарина,  АЧТВ-реагент  и  0,025М  раствор 
кальция  хлорида.  В  качестве  разбавителя  стандартного  и  испытуемых 
образцов  используют  0,9%  раствор  натрия  хлорида.  Стандартный  образец 
гепарина  растворяют  в  очищенной  воде  согласно  указаниям  в  инструкции. 
Готовят 3 разведения стандартного образца с активностью гепарина 0,3, 0,4 и 
0,5  МЕ/мл.  Образцы  стандарта  с  данными  активностями  должны  удлинять 
время  свертывания  нормальной  плазмы  минимум  в  1,5  раза,  в  противном 
случае  следует  использовать  разведения  с  большей  активностью  гепарина. 
Параллельно  готовят  3  разведения  исследуемого  образца  таким  образом, 
чтобы ориентировочно активность гепарина в данных разведениях попадала 
в интервал активности гепарина в разведениях стандартного образца. 

Анализ 

проводят 

с 

помощью 

автоматического 

или 

полуавтоматического  коагулометра  в  пластиковых  пробирках  при 
температуре  37°С.  В  пробирку  вносят  100  мкл  нормальной  человеческой 

3155