background image

Гелевый  метод  основан  на  использовании  гелевой  карты, 

представляющей  собой  пластиковый  планшет  с  микропробирками, 
наполненными  гелевыми  колонками.  Каждая  микропробирка  состоит  из 
дозирующей/инкубационной 

камеры 

и 

колонки, 

содержащей 

полимеризованные  микросферы  декстрана  в  буферном  растворе  низкой 
ионной  силы  (LISS),  смешанном  с  поливалентной  антиглобулиновой 
сывороткой (сыворотка Кумбса).  

В  дозирующую/инкубационную  камеру  микропробирки  вносят  по  1 

капле 0,8%  суспензии  стандартных  эритроцитов  человека  группы крови  А

1

 

(II)  (первый  ряд)  и  0,8%  суспензии  эритроцитов  человека  группы  крови  В 
(III) (второй ряд) и по 25,0 мкл соответствующего разведения испытуемого 
образца (ИО). Пробы инкубируют при температуре (37±0,5)°С в течение 15 
мин.  По  окончании  инкубации  пробы  центрифугируют  на  специальной 
центрифуге 

(для 

гелевых 

карт) 

в 

стандартных 

условиях 

(запрограммированный режим) и оценивают агглютинацию.  

Титр  гемагглютининов  определяют  как  максимальное  разведение 

испытуемого  образца,  при  котором  наблюдают  распределение 
агглютинированных эритроцитов в толще гелевой колонки или в её верхней 
части.  Неагглютинированные  эритроциты  оседают  на  дно  микропробирки. 
Разведение до содержания белка 30 г/л при определении титра не учитывают. 

Примечания 

1.  Подготовка  испытуемого  образца.  Испытуемый  препарат  разводят 

солевым  раствором  (0,9%  раствор  натрия  хлорида  или  буферный  раствор 

низкой ионной силы (LISS)) до содержания белка 30 г/л.  

Готовят  два  ряда  двукратных  разведений  испытуемого  образца  с 

использованием  1%  раствора  бычьего  сывороточного  альбумина  (1:2;  1:4; 

1:8;  1:16; 1:32; 1:64;  1:128).  При  использовании  гелевого метода  (Метод  В) 

разведения  препарата  готовят  с  использованием  0,9%  раствора  натрия 

хлорида или буферного раствора низкой ионной силы (LISS). 

2.  Подготовка  суспензии  стандартных  эритроцитов.  Эритроциты 

человека группы крови А

1

 (II), резус-отрицательные (свежеприготовленные, 

не более 3 сут хранения) центрифугируют 10 мин при 1500–2000 об/мин при 

комнатной  температуре,  надосадочную  жидкость  сливают.  Полученный 

3165