background image

 

время хроматографирования.  

В 

процессе 

разделения 

фракций 

иммуноглобулинов 

на 

хроматографической  колонке  белковые  молекулы  иммуноглобулина  с 
молекулярной  массой  более  40  кДа  свободно  проходят  между  гранулами 
носителя  (сорбента),  не  попадая  и  не  задерживаясь  в  пористых  гранулах. 
Более  мелкие  молекулы  частично  попадают  и  задерживаются  в  гранулах  и 
медленнее вымываются из них подвижной фазой. Очень мелкие молекулы с 
молекулярной массой менее 50 кДа попадают в гранулы носителя и медленно 
вымываются 

подвижной 

фазой. 

Распределение 

по 

времени 

удерживания/выхода  компонентов  (фракций)  иммуноглобулинов,  о  чем 
указывается  в  фармакопейных  статьях  или  нормативной  документации, 
происходит  в  порядке  уменьшения  их  молекулярных  масс:  полимеры 
(агрегаты),  димеры,  мономеры  Ig  G  (основная  фракция  сывороточного 
иммуноглобулина) и фрагменты  Ig G.  

Количественный  анализ  иммуноглобулинов  состоит  из  следующих 

стадий:  1)  хроматографическое  разделение;  2)  измерение  площади  и/или 
высоты 

пиков; 

3) 

расчет 

количественного 

состава 

фракций 

иммуноглобулинов  на  основании  хроматографических  данных;  4) 
интерпретация полученных результатов (статистическая обработка данных). 

Содержание  компонентов  (фракций)  иммуноглобулинов  вычисляется 

автоматически  с  помощью  программного  обеспечения  счетно-
аналитического  прибора  по  площадям  пиков  и  указывается  в  процентах. 
Процентное  содержание  определяемых  компонентов  иммуноглобулинов 
должно  соответствовать  требованиям,  указанным  в  фармакопейной  статье 
или нормативной документации.  

Пригодность 

хроматографической 

системы 

оценивается 

по 

стандартным  образцам

Хроматографическая  система  считается  пригодной, 

если  выполняются  условия,  описанные  в  фармакопейной  статье  или 
нормативной  документации:  фактор  разрешения  (R)  между  пиками, 
эффективность  хроматографической  колонки,  рассчитанная  по  пику  с 

Предыдущая <  | 3169  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF