Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

–

антиген должен представлять максимально возможное количество
белков-антигенов;

–

поликлональные антитела, вырабатываемые на полученный таким
образом антиген, должны связывать максимально возможное количество
белков-антигенов и не давать перекрестного связывания с целевым
белком;

–

оценку результатов проводят, сравнивая данные тестирования
испытуемого образца с калибровочным графиком, полученным при
тестировании антигена;

–

для определения остаточных белков клеток хозяина возможно
использования готовых наборов реагентов, использование которых
должно быть подтверждено материалами валидации методики.

Остаточная ДНК штамма-продуцента

может быть определена

методом гибридизации с зондами, меченными биотином, дигоксигенином
или другой меткой.

Для получения стандартной пробы проводят выделение ДНК клеток

продуцента. Количественное определение содержания ДНК в стандартных
пробах проводят спектрофотометрически. При проведении анализа следует
убедиться, что белок, полученный в результате производственного процесса,
не влияет на определение ДНК.

Оценку результатов проводят, сравнивая данные тестирования

испытуемого образца с данными, полученными при тестировании
стандартных проб ДНК штамма-продуцента.

Допускается определение остаточной ДНК штамма-продуцента

методом ПЦР в реальном времени, а также методами, не связанными со
специфической нуклеотидной последовательностью. К ним относятся:

−

связывание ДНК с мечеными антителами к ДНК и последующая

реакция полученного комплекса с антителом к этому белку (Threshold);

−

непосредственное связывание ДНК с флуоресцентным