или 

Pichia  pastoris

).  Производство  основано  на  системе  банков  клеток-

продуцентов - Главного банка клеток (ГБК) и Рабочего банка клеток (РБК).  

Схема  производственного  процесса  генно-инженерных  препаратов 

инсулина, как правило, включает: 

1.

 

Получение посевного материала штамма-продуцента. 

2.

 

Биосинтез рекомбинантного белка (РБ) (препроинсулина): 

- ферментация (культивирование продуцента); 
- сепарирование (получение биомассы); 
- дезинтеграция клеточной суспензии; 
- центрифугирование (выделение и отмывка телец включения). 
3.

 

Выделение и очистка РБ (препроинсулина).  

4.

 

Солюбилизация  телец  включения  и  восстановление  (денатурация) 

РБ: 

- ренатурация (рефолдинг) РБ; 
- хроматографическая очистка проинсулина. 
5.

 

Ферментативное расщепление проинсулина. 

6.

 

Ступени очистки инсулина, каждая из которых включает несколько 

стадий очистки, например: 

- хроматографическая очистка инсулина 1 
- хроматографическая очистка инсулина 2 
- хроматографическая очистка инсулина 3 
7.

 

Получение кристаллического инсулина: 

- кристаллизация и отмывка; 
- высушивание. 
8.

 

Получение лекарственной формы . 

Все  этапы  процесса  производства  должны  быть  валидированы,  в  том 

числе,  эффективность  каждого  этапа  очистки  в  отношении  удаления  и/или 
инактивации посторонних агентов и примесей, источником которых могут быть 
штамм-продуцент  (ДНК),  примеси,  связанные  с  процессом  производства, 
например,  гетерологичных  белков  (иммуногенные  примеси,  компоненты 

Предыдущая <  | 2708  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF