background image

Разведение  Объем вно-

симого I 

разведения 

вакцины, 

мл 

Объем 

вносимого 

растворите

ля, мл 

Кратность 

разведений 

исходной 

вакцины 

(в 0,5 мл) 

Иммунизирующая доза в 

объеме 0,5 мл 

Количество 

исходной 

вакцины, мл 

Количество 

МЕ 

(предполага

емое 

содержание) 

14 

1:28 

0,0357 

0,5 

II 

2,5 

10,0 

1:140 

0,0071 

0,1 

III 

0,5 

12,0 

1:700 

0,00142 

0,02 

 

Каждой  мыши  в  каждой  группе  внутрибрюшинно  вводят  по  0,5  мл 

одного  из  разведений  испытуемой  вакцины  или  референс-препарата.  К 
моменту  введения  заражающей  дозы  не  менее  94  %  иммунизированных 
мышей должно остаться в живых и без признаков заболевания. Если гибель 
животных превышает указанную величину, то опыт не подлежит учету. 

Приготовление  заражающей  суспензии  тест-штамма

 

B.  рertussis 

18323 

Бактериальную  суспензию 

B.  pertussis 

18323,  используемую  для 

заражения,  готовят  из  20

24-часовой  культуры  второго–третьего  пассажа, 

выращенной  на  среде  Борде-Жангу,  с  кровью  человека  или  КУА  с  кровью 
человека или на других, адаптированных к коклюшному микробу средах.  

Выросшую  культуру  контролируют  путем  микроскопии  мазков, 

окрашенных  по  Граму.  Микробные  клетки 

B.  рertussis  18323 

должны  быть 

морфологически 

однородны. 

Посторонняя 

микрофлора 

должна 

отсутствовать. 

Готовят 

бактериальную 

суспензию 

микробных 

клеток 

с 

концентрацией, соответствующей 10 МЕ по стандартному образцу мутности 
(разведение 1

А

). Все дальнейшие разведения микробной суспензии делают в 

1%  растворе  гидролизата  казеина,  содержащего  0,6%  раствор  натрия 
хлорида, рН (7,1±0,2).  

Полученную суспензию разводят последовательно так, чтобы получить 

заражающую  дозу,  содержащую  100000  микробных  клеток  (рабочая 
суспензия) в объеме 0,03 мл (100–1000 LD

50

) . Из рабочей суспензии готовят 

2765