Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Если в испытании используют высокочувствительную к коклюшным

антигенам линию мышей, то заражающую дозу тест-штамма 18323 следует
уменьшить до содержания 100–1000 LD

в объеме 0,03 мл.

Заражение иммунизированных животных

Мышам, иммунизированным испытуемой вакциной и референс-

препаратом, через 14

−

17 сут интрацеребрально вводят по 0,03 мл рабочей

суспензии живой культуры тест-штамма

B. рertussis

18323 (пробирка 4)

путем  прокола  лобной  кости  в  точке,  расположенной  в  2  мм  от  средней
линии  и  на  2  мм  выше  глаза.  Для  заражения  используют  туберкулиновые
шприцы с ценой деления 0,01 мл, используя иглу № 27, имеющую короткий
срез и муфту; длина свободного конца иглы от края муфты до среза должна
составлять  от  3  до  4  мм.  Для  определения  величины  LD

разведения

заражающей дозы (пробирки 5, 6, 7, 8) вводят контрольным мышам
соответствующих групп интрацеребрально по 0,03 мл.

Мышей, погибших в течение 3 сут после заражения, исключают из

опыта (неспецифическая гибель); в каждой клетке оставляют по 16 мышей.

За зараженными животными наблюдают 14 сут с ежедневной

регистрацией их гибели. В день учета результатов (14-е сут) в число
погибших включают также всех парализованных мышей.

Вычисление величины LD

(табл. 4) культуры тест-штамма

производят по формуле Кербера:

lgLD

= lg D

–δ(∑Li–0,5),

где: D

−

максимальная из испытуемых доз;

−

логарифм кратности разведения (отношение большей дозы к

следующей за ней меньшей дозе);

−

отношение числа животных, погибших при введении данной дозы

культуры, к общему числу животных, которым эта доза была введена;

∑Li

−

сумма значений Li, найденных для всех испытанных доз.

Таблица 4 –

Пример расчета величины LD

культуры тест-штамма

рertussis

18323