background image

требования. 

1.Испытание контрольной клеточной культуры 
1.1.Исследование в клеточных культурах

 

Испытанию  подвергается  не  менее  500  мл  незараженной  клеточной 

суспензии  в  концентрации,  используемой  для  посева  клеточных  культур-
продуцентов вакцины. 

Отобранную в качестве контрольной клеточную суспензию разливают 

во  флаконы,  клетки  оставляют  незараженными  и  инкубируют  в  тех  же 
условиях,  что  и  клетки,  используемые  для  производства  вакцины.  За 
контрольной клеточной культурой наблюдают до времени последнего сбора 
вирусов  с  культур-продуцентов  вакцины,  но  не  менее  14  сут.  В  конце 
периода наблюдения все флаконы с контрольными клеточными культурами 
исследуют  с  помощью  светового  микроскопа  на  наличие  цитопатических 
изменений.  Во  время  культивирования  контрольных  клеток  не  должно 
выявляться признаков специфической дегенерации. 

По  истечении  срока  наблюдения  (после  изучения  монослоя  под 

микроскопом) не менее 25 % контрольных клеточных культур проверяют на 
наличие феномена гемадсорбции с 0,25 % эритроцитами морской свинки, кур 
и  человека  I(0)  группы,  если  нет  других  указаний  в  нормативной 
документации.  Материал  инкубируют  в  течение  30  мин  сначала  при 
температуре  от  2  до  8  °С,  а  затем  при  температуре  от  20  до  25  °С.  Взвесь 
эритроцитов  сливают,  клеточный  монослой  трижды  отмывают  раствором 
Хенкса  или  0,9  %  раствором  натрия  хлорида  и  просматривают  под 
микроскопом на наличие гемадсорбции. 

Из оставшихся флаконов с контрольными культурами отбирают по 10 

мл  культуральной  жидкости.  Если  на  протяжении  срока  инкубации 
контрольных  культур  производят  сливы  вируссодержащей  жидкости  из 
производственных  культур,  то  в  те  же  сроки  берут  пробы  культуральной 
жидкости  из  флаконов  с  контрольными  культурами  и  сохраняют  их  при 
температуре  не  выше  минус  20  °С.  В  конце  наблюдения  пробы 

2774