Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

2.1.2. Метод В. Определение биологической активности инсулина по

снижению концентрации глюкозы в крови мышей.

В опыт берут не менее 40 мышей одного пола массой не менее 20,0 г.

Животных рандомизируют по массе на 4 группы не менее 10 животных в
каждой.

Внутри группы каждую особь нумеруют по порядку. Во время опыта

животным должен быть обеспечен свободный доступ к корму и воде.

Непосредственно перед экспериментом из основных растворов СО и

ИО  готовят  по  два  рабочих  раствора  (Примечания  1,  2).  Рекомендуемые
концентрации  рабочих  растворов,  например  для  самок,  могут  находиться  в
диапазоне  0,06  –  3,0  МЕ/мл.  При  испытании  некоторых  аналогов  инсулина
возможно  использование  более  низких  концентраций  рабочий  растворов.
Например, 0,03-0,06 МЕ/мл.

Согласно схеме двойного перекреста (Таблица), мышам первой и

второй группы подкожно в холку вводят по 0,1 мл/10 г массы тела животного
рабочие  растворы  СО,  а  третьей  и  четвертой  -  такие  же  объёмы  рабочих
растворов  ИО.  Рабочие  растворы  последовательно  вводят  каждому
животному, в соответствии с нумерацией, через каждые 15 - 20 с. Интервал
между  введениями  рабочих  растворов  каждой  группе  животных  должен
составлять 1-2 мин.

Вторую постановку теста (перекрест) проводят через 24 ч после

первой.

После инъекции инсулина через 40 ± 1 мин последовательно в

соответствии с номером каждого животного внутри группы из орбитального
венозного  синуса  глаза  с  помощью  стерильного  гепаринизированного
капилляра  берут  около  50  мкл  крови  в  микроцентрифужные  пробирки
объемом 0,5 мл. Необходимо соблюдать те же временные интервалы, что и
при  введении  растворов.  Определение  концентрации  глюкозы  в  крови
животных проводят согласно разделу 4.