Этап  введения  пробы  осуществляют  в  один  прием,  когда  образец 

смешивается  с  амфолитами  и  вводится  в  капилляр  под  давлением  или  под 
вакуумом,  или  в  несколько  приемов,  когда  в  капилляр  последовательно 
вводится  ведущий  буферный  раствор,  амфолиты,  образец,  смешанный  с 
амфолитами, снова амфолиты и, наконец, заключающий буферный раствор. 
Объем  образца  должен  быть  достаточно  малым,  чтобы  не  изменять  рН-
градиент. 

На  этапе  фокусирования  амфолиты  движутся  после  приложения 

напряжения  к  катоду  или  аноду  согласно  их  суммарному  заряду,  создавая, 
таким образом, рН-градиент от более низкого рН (у анода) к более высокому 
рН (у катода). Движение каждого аналита продолжается до тех пор, пока он 
не достигнет рН, соответствующего его изоэлектрической точке (p

I

). 

На этапе мобилизации полосы разделенных компонентов приводятся в 

движение  в  сторону  детектора  благодаря  электроосмотическому  потоку 
путем  приложения    давления  после  стадии  фокусирования  или  с  помощью 
добавления солей к флакону у катода или анода. 

Достигнутое  разделение,  выражаемое  как 

∆

p

𝐼

,  зависит  от  градиента 

рН

 

𝑑

pH

𝑑𝑥

�

,  количества  амфолитов,  имеющих  различные  значения  p

I

, 

молекулярного коэффициента диффузии (

D

), интенсивности электрического 

поля  (

E

)  и  вариации  электрофоретической  подвижности  аналита  в 

зависимости от рН

 

−𝑑μ

𝑑

pH

�

: 

∆

p

𝐼

= 3 

∙

 

�

𝐷

 (

𝑑

pH

𝑑𝑥

�

)

𝐸

 (

−𝑑μ

𝑑

pH

�

)

 .       (12)

 

Основными  параметрами,  которые  следует  учитывать  при  разработке 

разделения, являются: 

Предыдущая <  | 645  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF