background image

испарения жидкости. 

Сборку  прибора  и  его  очистку  после  использования  проводят  в 

соответствии с инструкцией производителя. 

Перед заливкой геля основание и боковые стороны ячейки закрывают 

подходящими прокладками, толщина которых определяет толщину рабочего 
геля (при этом после полимеризации геля прокладку в основании убирают). 
Ячейку заполняют раствором мономера с поперечно-сшивающим агентом и 
катализатором. Растворы должны быть дегазированы перед полимеризацией 
и  гели  должны  использоваться  свежеприготовленными.  Заливку  растворов 
проводят  таким  образом,  чтобы  исключить  попадание  внутрь  ячейки 
пузырьков воздуха.  

Гребенку, имеющую зубцы соответствующего размера (в зависимости 

от объемов наносимого образца), устанавливают в верхнюю часть ячейки на 
разделяющий  гель  и  оставляют  там  до  окончания  полимеризации  геля. 
Формирование  геля  обычно  занимает  не  менее  30  мин  и  может  считаться 
законченным, когда между гелем и водным слоем появляется четкая граница. 
После удаления гребенки из геля, прошедшего полимеризацию, остается ряд 
лунок.  

Заполняют  нижний  и  верхний  резервуары  камеры  предписанным 

электродным  буферным  раствором.  Готовят  испытуемый  и  стандартный 
растворы,  содержащие  краситель  и  сахарозу  или  другой  плотный  и  вязкий 
растворитель.  Наносят  образцы  шприцем  или  микропипеткой  в  основания 
лунок,  сразу  включают  электрический  ток  и  начинают  электрофорез, 
соблюдая предписанные условия (температуру и величину напряжения).  

После окончания процесса (когда краситель достигает нижней границы 

пластины)  ток  выключают,  пластину  удаляют  из  камеры,  зоны  фиксируют, 
окрашивают и при необходимости пластину высушивают. 

Подготовка полиакриламидного геля для вертикального электрофореза 

с SDS в неоднородной буферной системе 

Сначала  готовят  и  заливают  в  подготовленную  ячейку  нижний 

Предыдущая <  | 657  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF