background image

соответствующих  4-6  уровням  концентрации,  и  строят  экспериментальные 
зависимости  площадей  пиков  аминокислот  от  их  концентраций  в 
соответствующих  стандартных  растворах.  Полученные  калибровочные 
зависимости  аппроксимируют  линейной  функцией  (исключение  составляют 
зависимости,  полученные  с  использованием  испарительного  детектора 
светорассеяния  или  детектора  заряженного  аэрозоля)  и  используют  для 
расчета  концентраций  аминокислот,  присутствующих  в  исследуемом 
образце.  Калибровочные  зависимости,  должны  часто  обновляться  и 
проверяться  путем  анализа  контрольных  образцов  для  обеспечения 
достоверности получаемых результатов. 

Для  получения  точных  и  повторяемых  результатов  важно,  чтобы 

аналитик  готовил  образцы  для  аминокислотного  анализа  таким  образом, 
чтобы  они  соответствовали  области  применимости  методики  (например, 
ожидаемые  концентрации  аминокислот  в  испытуемом  образце  находились 
бы  в  рамках  линейных  рабочих  диапазонов  методики  для  каждой 
аминокислоты).  При  проведении  рутинного  анализа  может  использоваться 
одноточечная калибровка, когда концентрация аминокислот в используемом 
стандартном  растворе  соответствует  типичным  ожидаемым  концентрациям 
аминокислот в испытуемом растворе. 
 

Пробоподготовка 

Получение  точных  результатов  аминокислотного  анализа  требует 

дополнительной  очистки  испытуемых  образцов  белков  и  пептидов. 
Буферные  компоненты  (например,  соли,  мочевина,  детергенты)  могут 
оказывать  мешающее  влияние  и  удаляются  из  образца  перед  анализом.  В 
методиках,  использующих  пост-колоночную  дериватизацию  аминокислот, 
мешающее  влияние  буферных  компонентов  обычно  проявляется  менее 
выражено, чем в методиках, основанных на предколоночной дериватизации. 
В ходе пробоподготовки желательно ограничить количество манипуляций с 
образцами, чтобы уменьшить потенциальное фоновое загрязнение, улучшить 

Предыдущая <  | 679  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF