Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

быть  субстрат  или  ингибитор  фермента,  рецептор,  специфичный  к
определяемому гормону, антитела или др. Кроме того, лиганды могут быть
также  группоспецифические,  то  есть  обладающие  специфичностью  сразу  к
целой  группе  родственных  веществ,  например,  к  какой-либо  группе
ферментов.

Подвижная фаза

Подвижная фаза аффинной хроматографии представляет собой жидкий

элюент,  инертный  по  отношению  к  другим  компонентам  хроматографии
(неподвижная  фаза,  опредляемое  вещество).  Подвижная  фаза  должна
обладать низкой вязкостью и быть совместимой с используемыми методами
детектирования.  В  качестве  подвижной  фазы  обычно  буферные  водные
растворы  с  различными  pH,  состав  элюента  подбирается  в  зависимости  от
условий  хроматографирования.  Чаще  всего,  из-за  сильного  удерживания
компонетов  смеси  сорбентом,  необходимо  использование  ступенчатого  или
линейного градиентного элюирования.

Методика

Методика проведения колоночной аффинной хроматографии

аналогична  методике  любой  стандартной  колоночной  хроматографии.
Прежде  всего,  подготавливается  хроматографическая  колонка.  Для  этого
осуществляется  правильная  «набивка»  колонки  сорбентом.  Для  плотного  и
равномерного заполнения колонки возможно использование суспензионного
метода.  После  этого  колонка  обязательного  уравновешивается.  Затем  в
колонку  под  давлением  подается  элюент.  Проба  может  вводиться  как
фронтальным  методом,  так  и  через  специальный  дозирующий  кран  с
известным  объемом  петли.  На  выходе  из  колонки  раствор  элюента  с
разделенными  определяемыми  компонентами  проходит  через  детектор.  В
качестве детектора возможно использование любой детектирующей системы
для  колоночной  жидкостной  хроматографии  (см.  ОФС  «Хроматография»,