Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

объемам использования буферного раствора и непосредственно самого
сорбента, процесс легче масштабировать.

Тонкослойная

аффинная

хроматографя

представляет

собой

классический вариант тонкослойной хроматографии, где на пластинку
иммобилизован специфический лиганд.

Однако чаще всего в фармакопейном анализе используется

колоночный вариант аффинной хроматографии.

Оборудование

Для колоночной аффинной хроматографии используется стандартное

оборудование  для  колоночной  хроматографии.  Набор  необходимых  узлов
системы  обычно  включает  в  себя  хроматографическую  колонку,  насос,
систему  ввода  пробы,  систему  детектирования,  систему  сбора  и  обработки
данных.  Возможно  использование  коллектора  фракций  и  градиентного
смесителя.

Неподвижная фаза

Неподвижная фаза аффинной хроматографии представляет собой

специально  синтезированный  сорбент,  состоящий  из  инертного  носителя,
соединенного  со  специфическим  лигандом  (возможно  использование
«спейсера»  для  сшивки).  В  качестве  инертного  носителя  часто  используют
сефарозу  (агарозу,  имеющую  дополнительные  поперечные  сшивки),
например  сефароза  4В  или  сефароза  CL,  однако  при  необходимости
возможно  использование  и  других  носителей,  в  том  числе  неорганических.
Содержание  лиганда  обычно  не  превышает  5-15  мкмоль  на  1г  носителя.
Однако  его  должно  быть  достаточно,  чтобы  хроматография  имела
приемлемый выход. Лиганд и его связь с матрицей должны быть достаточно
стабильны в установленных хроматографических условиях (температура, pH,
ионная сила и т.д.). В качестве лиганда может выступать практически любое
соединение, имеющие специфичность к определяемому веществу. Это может