Количество пассажей полностью охарактеризованного главного посев-

ного вирусного материала для получения рабочего посевного вирусного ма-
териала, используемого для производства вакцины, не должно превышать 

5. 

Рабочий  посевной  вирусный  материал

 

должен  отвечать

 

следую-

щим требованиям

: 

Подлинность

. 

Производственный  штамм  вируса  бешенства  должен 

нейтрализоваться  иммуноглобулином  антирабическим  из  сыворотки  крови 
лошади

 

и не должен нейтрализоваться сывороткой крови крупного рогатого 

скота

 

нормальной. Индекс нейтрализации 

– 

не менее 100.

 

Для испытания параллельно готовят 

2 

ряда разведений

 

вируса

 

в диапа-

зоне 

(1:5) 

−

 (1:50000) 

с кратностью разведения 10. В качестве среды разведе-

ния  используют  2  %  раствор  сыворотки  крови  лошади  нормальной,  приго-
товленный с применением стерильной воды очищенной или воды для инъек-
ций.  Сыворотку  крови  лошади  нормальную  предварительно  инактивируют 
при температуре 56

 

о

С в течение 30 мин. Для получения разведений вируса в 

первую  пробирку  каждого  ряда,  соответствующую  разведению  1:5,  вносят 
0,4 мл среды разведения, в остальные пробирки ряда

– 

по

 

0,45 мл

 

среды раз-

ведения

. 

В первую

 

пробирку каждого ряда добавляют по 0,1 мл восстанов-

ленной суспензии вируса бешенства штамм «Внуково

-32» 

и тщательно пере-

мешивают содержимое

 

пробирок

. 

Далее

 

готовят ряд последовательных раз-

ведений путем переноса 0,05 мл смеси из предыдущей пробирки

 

в следую-

щую пробирку, каждый раз используя новую пипетку. Из последней

 

пробир-

ки, соответствующей

 

разведению 1:50000, удаляют 0,

0

5 мл

 

смеси

. 

В резуль-

тате конечный объем содержимого каждой пробирки составит 

0,4

5 мл смеси.

 

В каждую пробирку первого

 

ряда вносят по 0,45 мл иммуноглобулина 

антирабического  из  сыворотки  крови  лошади,  в  каждую  пробирку  второго 
ряда 

–

по  0,45  мл  сыворотки  крови  крупного

 

рогатого  скота

 

нормальной

, 

инактивированной при температуре 56

 °

С в течение 30 мин. В результате по-

лучают 2 ряда разведений  вируса бешенства штамм «Внуково

-32» 

в диапа-

зоне от 10

-1

 

до 

10

-5

. Содержимое пробирок осторожно перемешивают путем 

Предыдущая <  | 5368  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF