сти, помещают в 4 отдельные лунки плексигласовой доски. Затем в каждую
лунку добавляют по 0,4
–
0,5 мл 1 % суспензии куриных эритроцитов. Через
30–
40 мин контакта при температуре (20
±
2)
°
С, после оседания эритроцитов
в контроле, проводят учет гемагглютинации.
Контрольное испытание: проводят, как описано выше, но вместо ал-
лантоисной жидкости из куриного эмбриона в свободные 4 лунки панели
вносят по 0,4
–
0,5 мл фосфатного буферного раствора (рН 7,2
±
0,2).
Вычисление биологического титра проводят по методу Рида и Менча
(табл.1).
Метод основан на логической предпосылке, что тканевая культура или
животное, погибшие при заражении каким
-
либо разведением вируса, погиб-
нет и при заражении любым более низким разведением.
Таблица 1
–
Подсчет 50 % дозы (ТЦД
50
) по методу Рида и Менча
Раз
ведение
вируса
Ко-
личество
тест
-
объектов
Исходные
данные
Кумулятивные
данные
Пр
оцент
гибели
по-
гибло
вы
жило
по-
гибло
вы
жило
10
-5
4
4
0
7
0
100
10
-6
4
2
2
3
2
60
10
-7
4
1
3
1
5
17
10
-8
4
0
4
0
9
0
На примере подсчёта 50 %
дозы (ТЦД
50
–
количество цитопатогенных
доз) показано, что 50 % доза находится между разведениями вируса 10
-6
и 10
-
7
.
Далее расчет величины разведения (Х), которую необходимо прибавить
к разведению непосредственно ниже 50 % дозы (в
log
10
), производится по
следующей формуле:
Предыдущая < | 5398 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF