Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

каждую лунку вносят по 0,4 мл 1 % суспензии эритроцитов. Содержимое
лунок перемешивают встряхиванием планшета

и оставляют при температуре

(20

С на 40

–

45 мин (до оседания эритроцитов в контроле).

Реакцию оценивают по «четырехкрестовой

системе. За титр антигена,

или одну агглютинирующую единицу (АЕ), принимают наибольшее
разведение антигена, дающее четко выраженную агглютинацию эритроцитов
(+++ или

++++).

Определение титра антигена сопровождается отрицательным

контролем на отсутствие спонтанной агглютинации эритроцитов. С этой
целью в контрольную лунку того

же агглютинационнного планшета вносят

0,4 мл фосфатного буферного раствора и 0,4 мл 1 % суспензии эритроцитов.
При отсутствии спонтанной агглютинации на дне лунки выпадает
гомогенный с ровными краями осадок эритроцитов (отрицательная реакция).

3. Приготовление рабочей дозы антигена

В РТГА рабочей дозой

антигена является то разведение антигена, в 0,2

мл которого содержится 4

агглютинирующие единицы (4 АЕ). Для вычисления ее следует
установленную величину титра антигена разделить на 8. Полученная от
деления цифра указывает во сколько раз нужно развести антиген, чтобы в 0,2
мл его содержалось 4 АЕ (рабочая доза).

Перед постановкой основного опыта проверяют точность

приготовления рабочей дозы (4 АЕ). Для этого в пять лунок горизонтального
ряда плексигласового

планшета, начиная со второй, вносят по 0,2 мл

фосфатного буферного раствора. В 1

ю и 2

ю лунки добавляют по 0,2 мл

приготовленной рабочей дозы антигена. После перемешивания переносят 0,2
мл смеси из

лунки в

лунку, начиная со 2

й по 5

ю лунку

из 5

й лунки 0,2 мл

удаляют. Затем в каждую лунку добавляют по 0,2 мл фосфатного буферного
раствора и по 0,4 мл 1 % суспензии куриных эритроцитов. В 6

й лунке ставят

контроль на отсутствие спонтанной агглютинации эритроцитов. После