Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

встряхивания смесь оставляют при температуре (20

С на 40

–

45 мин (до

оседания эритроцитов в контроле).

При правильном выборе рабочей дозы полная (++++) агглютинация

эритроцитов должна наблюдаться только в первых трех лунках. В 4

й и 5

лунках  агглютинация  должна  отсутствовать.  В  случае  отклонения  от
указанного  выше,  разведение  антигена  должно  быть  изменено  путем
добавления  соответствующего  количества  антигена  или  фосфатного
буферного  раствора  для  получения  необходимой  рабочей  дозы.  При  этом
необходимо повторно проверить правильность приготовления рабочей дозы.

4. Постановка реакции торможения гемагглютинации

Для удаления

неспецифических

ингибиторов гемагглютинации

перед постановкой РТГА

сыворотки необходимо обработать нейраминидазой холерных вибрионов или

RDE-

реагентом (Примечания

После удаления неспецифических ингибиторов готовят двукратные

разведения сывороток в лунках плексигласовой доски, начиная с 1:10 до

:640 и выше в объеме 0,2 мл. К каждому разведению сыворотки добавляют

по 0,2 мл рабочей дозы антигена (4 АЕ). Смесь встряхивают и после контакта
антигена и сыворотки (от 30 мин до 1 час) при температуре (20

С в

каждую лунку добавляют по 0,4

мл 1 % суспензии куриных эритроцитов.

Смесь повторно встряхивают, оставляют при температуре (20

С в

течение 40

–

45 мин (до оседания эритроцитов в контроле), после чего

производят учет результатов реакции.

При наличии в сыворотке специфических антител наступает задержка

агглютинации эритроцитов. За титр сыворотки принимают предельное
разведение, вызывающее полную задержку гемагглютинации.

Задержка гемагглютинации указывает на соответствие типа антигена и

взятой сыворотки; отсутствие задержки гемагглютинации свидетельствует о
несоответствии типа взятой сыворотки

антигену

Примечания