Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

пластинах. На каждой пластине исследуют стандарт и

серии вакцины,

отводя  под  каждый  образец  по  два  ряда  лунок.  На  второй  пластине
проверяют те  же образцы, но расположение вакцин и стандарта произвольно
меняют.  Предварительно  готовят  500  мкл  смеси

детергента и антигенов

состоящей из

(50 мкл детергента и

450 мкл антигена)

и далее,

смесь

инкубируют при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем готовят
разведения антигенов: неразведенный антиген, 0,75, 0,5 и 0,25 мкл (или

соотношении:

1:0, 3:1, 1:1, 1:3), используя для разбавления ФБР

(

табл

.).

Таблица

–

Схема разведений антигена

Развед

ение

Соотнош

ение

Объем в мкл

Антиген

Растворитель

неразв

ед.

1:0

100

0,75

3:1

150

0,5

1:1

100

0,25

1:3

100

300

Вакцина и стандартный антиген

должны содержать

близкие количества

ГА, так, чтобы размеры зон преципитации могли быть сравнимы. Поэтому,
если  вакцина,  согласно  паспортным  данным,  содержит  меньше  ГА,  чем
стандарт,  необходимо  провести  предварительное  разведение  стандарта  и,
наоборот:  в  случае

если стандарт менее активен, чем вакцина, то делают

разведение разводится вакцинаы. В документации

на стандарт

должны быть

указаны рекомендуемые разведения стандарта и сыворотки.

Результаты анализа

Рассчитывают квадраты диаметров колец

преципитации каждого антигена на основании средних величин по двум
пластинам и строят график, откладывая

по оси ординат квадраты диаметров,

а по оси абсцисс

–

разведения антигенов. На графике зависимость квадрата

диаметров от разведений для каждой вакцины должна быть выражена прямой