ротки, которое в смеси с 3
LD
50
яда гадюки защищает от гибели 50
% мышей,
взятых в опыт (
LD
50
−
доза яда гадюки, вызывающая гибель 50
% взятых в
опыт животных в течение
2
сут).
Определение LD
50
яда гадюки
.
Яд гадюки разводят в стерильном 0,9
%
растворе натрия хлорида. Готовят 5
–
6 разведений, концентрация каждого из
которых больше концентрации предшествующего в 1,1 или 1,2 раза (шаг раз-
ведений 1,1 или 1,2 соответственно). Разведения яда готовят таким образом,
чтобы наибольшее разведение (содержащее наименьшее количество яда) не
вызывало гибели, а наименьшее разведение с максимальной дозой токсина
вызывало гибель 100 % мышей. Каждое разведение вводят мышам
массой 16
–
18 г внутривенно в объеме 0,5 мл. За животными наблюдают в течение
2
сут, регистрируя количество павших
животных
. LD
50
яда рассчитывают по
формуле Кербера:
lg LD
50
= lg D–
σ
(
Σ
L
i
–0,5),
где
: lg D –
логарифм максимальной из испытанных доз яда;
L
i
–
отношение числа павших к общему числу мышей, получивших
одно и то же разведение яда;
σ
–
логарифм шага разведений.
Определение специфической активности сыворотки против яда
гадюки
.
Для разведения испытуемой сыворотки и яда используют стериль-
ный 0,9
% раствор натрия хлорида.
Испытуемую сыворотку разводят так, чтобы, исходя из ее предпола-
гаемой активности, получить несколько разведений, отличающихся одно от
другого на 10
- 20 %.
Яд гадюки разводят до содержания 10
LD
50
в 1 мл (3
LD
50
в 0,3 мл). Готовят смеси яда змеи и подготовленных разведений испы-
туемой сыворотки, в которых
на 0,2 мл сыворотки должно приходиться 0,3
мл яда. Общий объем смеси должен быть достаточен для введения по 0,5
мл
5 –
6 мышам. Смеси яда и разведений сывороток инкубируют 45 мин при
температуре (37 ± 0,5) ºС и вводят внутривенно в объеме 0,5 мл мышам
мас-
сой 16
–
18 г. Каждый опыт сопровождают контролем активности яда змеи.
Предыдущая < | 5564 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF