Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

Определение проводят на 6

7 суто

чных

РКЭ

со скорлупой белого цвета.

Для испытания используют 2 ампулы с вакциной

восстановленной

в 5 мл

фос-

фатного забуференного физиологического раствора рН

(7,0±0,2).

Полученная

суспензия содержит живой компонент вакцины в разведении

-1

(учитывается

доза розлива вакцины 0,5 мл и её исходное разведение по возбудителю в среде
высушивания 1:2). Далее готовят

ряд последовательных

десятикратных

разве-

дений

вакцины от 10

-2

до 10

-11

Разведения вакцины

-7

-10

-11

являющиеся ра-

бочими для данного испытания, вводят в полость желточного мешка РКЭ

объеме 0,5 мл.

На каждое разведение вакцины используют по 10 куриных эм-

брионов,

которые после введения вакцины инкубируют при температуре 35

-37

С и относительной влажности воздуха 40

60 % в течение 13 сут. Эмбрионы,

погибшие

с 5 по 13 сут,

вскрывают в день гибели

оставшиеся живыми

–

на 13

сут. С помощью стерильных анатомических пинцетов из каждого эмбриона из-
влекают кусочек

оболочки желточного

мешка, который после промывания в

фосфатном забуференном физиологическом растворе

7,0±0,2)

тщательно

растирают

на хорошо обезжиренном предметном стекле. Мазки высушивают на

воздухе,

фиксируют смесью Никифорова

состоящей из равных объемов спирта

этилового и эфира диэтилового и окрашивают по методу Романовского

Гимзы

Примечания

Окраска по методу Романовского

Гимзы.

Приготовление фосфатно

буферного раствора

(ФБС

ФБС

готовят в со-

ответствии с инструкцией по применению красителя Азур

–

Эозин по Романов-

скому (в растворе). Для

приготовления ФБС допускается использование гото-

вых наборов «Фосфатный буфер» с рН 6,8

–

7,2. Полученный раствор исполь-

зуют для разведения красителя и промывки стекол.

Фосфатный буферный рас-

твор хранят в плотно закрытом флаконе при температуре 2

– 8

С в течение 3

мес, при комнатной температуре

не более 1 мес.

Приготовление

рабочего раствора красителя

Смешивают краситель Азур

Эозин с буферным раствором в соотношении 1:5

1:10 и фильтруют

через

двойной бумажный фильтр. Степень разбавления красителя устанавливают

опытным путем. Рабочий раствор красителя

готовят

непосредственно перед

окраской мазков

хранят при комнатной температуре в течение 6

8 ч.

Краситель

Азур

Эозин по Романовскому (сухой).

При отсутствии готово-

го красителя Азур

–

Эозин по Романовскому в растворе

допускается приготов-

ление раствора красителя из Азур

Эозин по Романовскому сухого (далее