красящая смесь):
раствор красителя готовят из расчета 800 мг на 100 мл раство-
рителя. Берут навески красящей
смеси массой 300 мг и 500 мг. Навеску массой
300 мг помещают в фарфоровую ступку и добавляют 100 мл растворителя
(смесь равных объемов спирта
этилового 100 % и глицерина). Растирают навес-
ку с растворителем
и далее,
помешивая, добавляют навеску красящей смеси
массой 500 мг до получения однородной смеси
.
Приготовленный раствор кра-
сителя хранят в сухом прохладном месте в плотно закрытом сосуде темного
стекла в течение
1
мес.
Приготовление рабочего раствора красителя: к 1 мл раствора красителя
добавляют 2 мл основного буферного раствора
,
47 мл воды очищенной
и пере-
мешивают
.
Рабочий раствор красителя хранят при комнатной температуре в те-
чение 6
-
8 ч.
Фиксированные мазки окрашивают согласно инструкции по применению
красителя Азур
–
Эозин по Романовскому (в растворе). Время окраски состав-
ляет 20
-
40 минут (устанавливается опытным путем).
По окончании окрашива-
ния мазки промываются фосфатным буферным раствором
(
рН 6,8
– 7,2).
До-
пускается использование для промывки препаратов водопроводной воды, воды
очищенной с рН 6,8 ±0,3 (при этом необходимо избегать длительного контакта
препарата с водой).
В мазках из
оболочек
желточных мешков куриных эмбрионов,
зараженных
разведениями вакцины 10
-7
- 10
-8
,
коксиеллы должны обнаруживаться микро-
скопически. В мазках из оболочек
желточных мешков
куриных эмбрионов,
за-
раженных разведениями вакцины 10
-9
-10
-11
, можно не получить микроскопиче-
ски подтверждаемого накопления коксиелл.
В этом случае необходимо прове-
дение субпассажа.
Приготовленные мазки просматривают в световом
биологическом микро-
скопе
(
масляные иммерсионные объективы 90х
(1,25),
100х
(1,3)
и окуляры 7х и
10х).
Коксиеллы должны иметь фиолетовую окраску и быть представлены пре-
имущественно мелкими кокковидными формами «а»
,
допускается наличие па-
лочковидных форм
«b»
и нитевидных форм «
d
». Учет проводят на основании
оценки накопления коксиелл по условной «трехкрестной» системе
.*
Предыдущая < | 5607 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF