Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

ния проводят на 5 здоровых белых мышах массой тела 18

20 г и двух морских

свинках массой тела 250

300 г. Тест

доза для белых мышей составляет 0,5 мл

(внутрибрюшинно), для морских свинок

–

5,0 мл (подкожно в оба бока по 2,5

мл). Период наблюдения за животными составляет 7 сут.

Специфическая активность

Препарат должен давать положительную

реакцию диффузной преципитации (РДП) с сибиреязвенным цитоплазматиче-
ским антигеном

(ЦПА) в разведении не менее 1:60. Должен защищать от гибели

не менее 4 из 6 морских свинок при введении им 50

штамма

В. аnthracis

71/12.

. Активность в РДП с сибиреязвенным ЦПА.

Приготовление сибиреязвенного

ЦПА

В бульон Хоттингера рН

7,2

0,1

высевают споровую культуру штамма

В. аnthracis

СТИ

1 из расчета не менее 20

млн живых спор в 1

мл (определение проводят в соответствии с ОФС «Опреде-

ление концентрации микробных клеток»)

и инкубируют в термостате при тем-

пературе (37

1) ºС в течение (21

ч. В бульоне должен наблюдаться рост

культуры у дна пробирки в виде ватных хлопьев и взвешенных комков, не дол-
жен вызывать помутнения среды. Полученную бульонную культуру по (9

мл

высевают на один матрац с 3

% агаром Хоттингера рН

7,2

0,1 с аминным азо-

том (2,2

0,2) %.

Покачиванием матраца поверхность агара равномерно увлаж-

няют бульонной культурой. Матрацы в вертикальном положении инкубируют в
термостате при температуре (35,5

0,5)

ºС в течение 24 ч. Затем из матрацев

удаляют остатки бульонной культуры и конденсата. Агаровую культуру смы-
вают 50

мл 0,9 % раствором натрия хлорида. Надосадочную жидкость удаляют,

осадок ресуспендируют стерильным 12 % раствором натрия хлорида до кон-
центрации (8,5

0,5) млрд клеток в 1 мл суспензии. Полученную суспензию вы-

держивают при температуре (21

1) ºС в течение 10 сут при периодическом пе-

ремешивании. Для консервации к суспензии бактерий добавляют тиомерсал в
концентрации 1:20000. Через 10 сут суспензию центрифугируют при 1000

течение 20 мин и надосадочную жидкость используют в качестве антигена.