Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

мывания от сыворотки. После этого пластинку вынимают, накрывают филь-
тровальной бумагой, прокалывают бумагу иглой над лунками и сушат на
воздухе при температуре 18

–

20 °С. После высушивания геля агарозы пла-

стинку с гелем переносят в кювету с красителем на 2

0–

25 мин, а затем в кю-

вету с раствором для обесцвечивания окрашенных гелей на 15

–

20 мин, далее

пластинку промывают водой

и сушат при температуре 18

– 20

°С.

По окончании процедуры измеряют высоту пика (h) от края лунки до

максимальной внешней высоты

пика

(ракеты). Строят калибровочный

гра-

фик, откладывая по оси абсцисс концентрации Ви

антигена, а по оси ординат

−

высоту

пика

(

«ракеты»

)

СО.

По калибровочной кривой находят концентра-

цию Ви

антигена в испытуемом образце

с учетом предварительного разведе-

ния.

Содержание Ви

антигена

(

)

процентах вычисляют

по формуле:

𝑋𝑋

∙

100

где:С

концентрация Ви

антигена в испытуемом образце, найденная по

калибровочному графику, с учетом предварительного разведения, мкг/мл;

50 -

среднее номинальное значение содержания Ви

антигена в 1 мл

анализируемой вакцины, мкг/мл.

Построение калибровочного графика

. СО Ви

антигена разводят, исхо-

дя из аттестованного значения, до концентрации 20 мкг/мл в соответствии с
инструкцией

по применению

0,1; 0,2; 0,3; 0,4

мл

прибавляют воду очи-

щенную до конечного объема 0,4 мл

(концентрация Ви

антигена в получен-

ных растворах

5; 10; 15; 20

мкг/мл соответственно). В пробирку, содержа-

щую 0,4 мл раствора СО, воду очищенную не добавляют. Растворы исполь-
зуют свежеприготовленными.

Примечания

1. Приготовление испытуемого

раствора

Испытуемый образец анали-

зируемой вакцины разводят в 5 раз. Для этого к содержимому ампулы добав-

ляют 2

мл трис

боратного буферного раствора с трилоном Б, рН 8,6

– 8,8

(раствор 3

Раствор хранят при температуре

2 –

8 °С

в течение

6 мес.

2. Приготовление концентрированного

трис

боратного

буферного

рас-

твора

с трилоном Б, рН 8,6

– 8,8

(раствор 1).

мерной колбе вместимостью