этиловом спирте) и 0,2 мл 40 % раствора калия гидроксида и взбалтывают.
При положительной реакции наблюдается вишнево-красное окрашивание.
Положительный контроль –
Enterobacter aerogenes, Serratia marcescens.
Отрицательный контроль –
Escherichia coli
.
Примечание
1.
Приготовление среды Кларка для реакции Фогеса-Проскауэра.
Состав
:
•
Пептон
0,5 г
•
Калия гидроортофосфат
0,5 г
•
Глюкоза
0,5 г
•
Вода очищенная
80 мл
Перечисленные ингредиенты размешивают при подогревании в течение
20 мин. Фильтруют через бумажный фильтр, охлаждают до температуры 20
°С и доводят объем до 100 мл водой очищенной. Разливают по 5 мл в
пробирки и стерилизуют 3 дня текучим паром по 30 мин.
2. Приготовление реактива к реакции Фогеса-Проскауэра
Реактив 1. Навеску 5 г альфа-нафтола растворяют в 100 мл 96 % спирта
этилового.
Реактив 2. Навеску 40 г калия гидроксида растворяют в 100 мл воды
очищенной.
3.8 Тест на гидролиз мочевины (тест на уреазу)
Тест на уреазу предназначен для дифференциальной диагностики
некоторых микроорганизмов и заключается в способности некоторых
бактерий гидролизовать мочевину с образованием аммиака и углекислоты.
Это приводит к изменению рН среды до щелочных показателей. О наличии
уреазы у бактерий судят по покраснению среды, содержащей мочевину.
Готовят бульон с мочевиной: к 100 мл стерильного МПБ (pH 7,0)
добавляют 1 г мочевины и 0,2 мл фенолового красного (1,6 % спиртовой
раствор). Разливают по 2 – 3 мл в стерильные пробирки, укупоривают ватно-
марлевыми пробками и стерилизуют текучим паром в течение 10 мин.
В пробирку с бульоном, содержащим мочевину, вносят 1 петлю
суточной культуры, выращенной на МПА, инкубируют в термостате при
температуре (37 ± 1) °С в течение 24 ч. Изменение окраски среды с желтой до
Предыдущая < | 2876 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF