Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

компонента должно быть предусмотрено применение контрольных образцов
с концентрацией, соответствующей пределу количественного определения
примеси.

Оборудование

Прибор для проведения изоэлектрофокусирования состоит из:

−

высоковольтного источника питания с программой, специально

разработанной для изоэлектрофокусирования в полиакриламидных гелях, с
максимальным напряжением не менее 3000 В, током 300 мA и мощностью
300 Вт;

−

электрофорезной камеры из жесткой пластмассы, содержащей

охлаждающую пластину из соответствующего материала для поддержания
геля;

−

платиновых электродов, которые соединяются с гелем

посредством электродных (бумажных или гелевых) полосок необходимой
ширины, длины и толщины, пропитанных анодным и катодным буфером.

Изоэлектрофокусирование в полиакриламидных гелях

Форма для приготовления полиакриламидного геля состоит из двух

стеклянных пластин, пластикового листа, прокладок (спейсеров) и зажимов,
скрепляющих всю конструкцию.

Для метода изоэлектрофокусирования используют гели с

максимальной  пористостью  и  достаточной  механической  прочностью.  Эти
свойства  зависят  от  относительного  содержания  акриламида  и
бисакриламида (используемые для сшивки гелей).

Поскольку молекулярная масса большинства известных белков не

превышает 200000 Да возможно использование 7,5% гелей.

Примечания

1. Приготовление основного 30 % раствора акриламида. В мерную

колбу вместимостью 100 мл помещают 29,1 г акриламида и 0,9 г

метиленбисакриламида, прибавляют 70 мл воды деионизованной,

перемешивают до полного растворения, доводят объем раствора