концентрации 10 % и перемешивают (табл.).
Таблица
−
Соотношение содержания белкового азота, объема
анализируемого образца, реагента и минерализата для колориметрирования
Содержание
белкового
азота в
анализируемом
образце, мг/мл
Объем
анализируемого
образца (А), мл
Трихлоруксусная кислота
Объем
минерализата
(В), мл
объем, мл
исходная
концентрация,
%
0,010-0,016
5
0,72
80
2,0
0,016-0,030
3
0,43
80
2,0
0,030-0,050
3
0,43
80
1,0
0,050-0,080
2
2,00
20
1,0
0,080-0,200
1
1,00
20
1,0
0,200-0,400
1
1,00
20
0,5
Пробу оставляют на 18–20 ч при температуре 4–8 °С. Образовавшийся
осадок отделяют от надосадочной жидкости центрифугированием при 2000
об/мин при температуре 4–6 °С в течение 30 мин. Далее осадок промывают 1
мл 10 % раствора ТХУ и вновь центрифугируют в аналогичных условиях. К
осадку прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной. Пробирку
закрывают стеклянным колпачком и минерализуют на песочной бане при
температуре 190–210 ºС. Одновременно в аналогичных условиях
минерализуют контрольную пробу, содержащую 0,1 мл серной кислоты
концентрированной. Для ускорения минерализации используют водорода
пероксид, который периодически добавляют по 1 – 2 капли в предварительно
охлажденную пробирку. Минерализацию продолжают не менее 10 ч до
обесцвечивания содержимого пробирки. К полученному минерализату
добавляют 9,9 мл воды очищенной и перемешивают.
В химическую пробирку вносят необходимое количество минерализата
(В) (табл.), содержащего 8–20 мкг азота, доводят объем раствора до 9,5 мл
водой очищенной, перемешивают, прибавляют 0,5 мл реактива Несслера и
вновь перемешивают.
Измеряют оптическую плотность испытуемого и калибровочных
растворов при 400 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм по сравнению с
Предыдущая < | 2976 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF