Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

При отсутствии характерной для микоплазм флюоресценции считают,

что контаминация микоплазмами не обнаружена и испытуемый образец
удовлетворяет требованиям испытания.

Обнаружение

характерной

для

микоплазм

флюоресценции

свидетельствует о контаминации испытуемого образца микоплазмами и
образец считается не соответствующим требованиям испытания.

Результаты испытания будут считаться недостоверными, если в

образцах положительного контроля микоплазмы не обнаружены, а
обнаружены в отрицательном контроле. В случае получения сомнительных
результатов следует проводить повторные испытания.

Примечания
1.

Приготовление красителя Hoechst-33258 (Bisbenzimide)

А. Приготовление концентрированного раствора

. В 100 мл стерильной воды

очищенной растворяют 5,0 мг красителя. Раствор хранят в защищенном от

света месте при температуре от 2 до 8

С не более 1 года.

Б. Приготовление основного раствора.

К 100 мл стерильной воды

очищенной добавляют 0,5 мл концентрированного раствора красителя и

перемешивают. Раствор готовят перед использованием.

В. Приготовление рабочего раствора.

Основной раствор красителя

смешивают с раствором Хенкса без индикатора в соотношении 1:9 и

немедленно используют для окраски испытуемых образцов. Рабочий раствор

хранению не подлежит.

2. Подготовка люминесцентного микроскопа.
Проводят подготовку люминесцентного микроскопа к работе согласно

Руководству по эксплуатации. Просматривают препараты в люминесцентном

микроскопе при увеличении ок.10×, об.90× (масляная иммерсия) или

об.70×/85× (водная иммерсия).

3. Подготовка предметных стекол. Предметные стекла промывают в

проточной водопроводной воде в течение 10–15мин, затем кипятят 5–7 мин в

воде очищенной, протирают стерильной салфеткой и помещают на 1 сут в

смесь Никифорова (смесь равных объемов 96

этилового спирта и эфира для

наркоза). Стекла извлекают из смеси Никифорова с помощью пинцета,

протирают стерильной салфеткой и стерилизуют в течение (30 ± 2) мин при

температуре (120 ± 2)

С.