Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

антитоксинсвязывания.

За опытную дозу (L

/50) ботулинических токсинов типов А, В и Е

принимают  минимальное  количество  токсина,  которое  при  внутривенном
введении  мышам  в  смеси  с  1/50    МЕ  соответствующего  антитоксина
вызывает гибель 50 % животных в течение 4 сут.

Для определения опытной дозы готовят 5 – 7 последовательных

разведений токсина в 0,9 % растворе натрия хлорида, отличающихся одно от
другого на 10 – 20 %. Для этого в ряд пробирок вносят по 1,5 мл одного из
разведений токсина, 1 мл соответствующего антитоксина, содержащего 0,1
МЕ, и 1 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. Смеси инкубируют в термостате
при температуре (37 ± 1)

С в течение (45 ± 1) мин и вводят группам белых

мышей  с  массой  тела  16  –  18  г  (не  менее  4  животных  в  каждой  группе)
внутривенно  в  объеме  0,7  мл.  За  животными  наблюдают  в  течение  4  сут,
учитывая  количество  павших  животных  от  каждого  разведения  токсина.
Наибольшее разведение токсина, вызвавшее гибель 50 % животных в группе,
считают рабочим разведением (1,5 мл этого разведения содержат 5 опытных
доз).

Проведение реакции антитоксинсвязывания

Исходя из предполагаемого содержания анатоксина в испытуемом

препарате,  готовят  несколько  его  последовательных  разведений  в  0,9  %
растворе натрия хлорида, отличающихся друг от друга на 10 – 25 % до
0,1  ЕС/мл  (табл.).  По  1  мл  одного  из  разведений  анатоксина  помещают  во
флаконы и добавляют по 1 мл соответствующего антитоксина, содержащего
0,2 МЕ. Смеси тщательно перемешивают и инкубируют при температуре
(37  ±  1)  ºС  в  течение  (45  ±  1)  мин.  Во  время  инкубации  происходит
связывание  испытуемого  анатоксина  с  антитоксином  в  эквивалентном
соотношении.  Содержание  антитоксина,  не  связавшегося  с  анатоксином,
определяют  по  его  токсиннейтрализующей  способности.  С  этой  целью  в
каждый  флакон  вносят  1,5  мл  соответствующего  токсина,  содержащего  5