Во всех методах расчет активности производят при сравнении
активности тестируемого образца с активностью Международного стандарта
NIBSC или вторичного стандартного образца фактора свертывания,
откалиброванного
относительно
международного
стандарта
в
международных
единицах
активности
(МЕ).
Эквивалентность
международного стандарта в МЕ устанавливается ВОЗ. За 1 МЕ (100%)
принимают активность фактора свертывания в 1,0 мл свежей нормальной
пулированной плазме крови от 300 доноров. Активность может быть
выражена в МЕ/мл, МЕ/флакон, МЕ/мг белка и в % от заявленного
производителем количества.
ФАКТОРЫ
Фактор I (фибриноген)
Клоттинговый метод
Определение активности фибриногена проводят методом Клаусса.
Принцип метода
При добавлении тромбина к образцу, содержащему фибриноген,
наблюдается образование сгустка фибрина. При использовании тромбина с
высокой активностью (~10 МЕ/мл) и образцов с низкой концентрацией
фибриногена (ниже 100 мг/дцл) можно получить линейную зависимость.
Для определения фибриногена используют коммерческие тестовые
системы, в состав которых входит реагент тромбина, содержащий ингибитор
гепарина, и буфер для разведения образцов или коммерческий тромбин-
реагент.
Концентрация фибриногена выражается в мг/дцл. Для построения
калибровочного графика используют стандартный образец фибриногена или
аттестованную по международному стандарту плазму-калибратор.
Стандартный образец или образец плазмы-калибратора растворяют в
дистиллированной воде согласно инструкции. Готовят 5 последовательных
разведений стандартного образца, начиная с концентрации ~ 100 мг/дцл, с
помощью буфера для разведения образцов pH = 7,3±0,1. Анализ проводят
Предыдущая < | 3137 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF