Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

при температуре 37°С согласно инструкции к набору. Для каждого
разведения трижды определяют время образования сгустка. По полученным
результатам в логарифмических координатах строят калибровочный график
зависимости времени образования сгустка от концентрации фибриногена.

Готовят 2 разведения испытуемого образца с концентрацией ниже 100

мг/дцл. Для каждого разведения время образования сгустка определяют
трижды. Количество фибриногена в каждом разведении определяют по
калибровочному графику.

Фактор II (тромбин)

Клоттинговый метод

Определение активности фактора II проводят с использованием в

качестве субстрата человеческой плазмы, дефицитной по фактору II. Процесс
свертывания активируется добавлением к смеси кальция тромбопластина.

Для разведения стандарта и препаратов используют NaCl-

имидазоловый  буфер  pH  7,3±0,1  с  добавлением  0,1%  бычьего  или
человеческого  альбумина.  Для построения  калибровочного  графика  готовят
серию  последовательных  разведений  стандарта  фактора  II  в  интервале
активности  от  0,3  до  1  МЕ/мл.  Препарат  разводят  до  концентрации  менее
1 МЕ/мл.  Анализируют  3  разведения  препарата.  Для  каждого  образца
измерение  времени  свертывания  проводят  минимум  2  раза.  Измерение
проводят в течение 1 ч после разведения препарата.

Анализ проводят при температуре (37±0,5)°С. В пластиковую пробирку

вносят  50  мкл  плазмы,  дефицитной  по  фактору  II,  и  50  мкл  разведения
стандарта или препарата. Смесь инкубируют при (37 ± 0,5)°С в течение 120 –
240 с. Время свертывания определяют с момента добавления к смеси 200 мкл
предварительно  нагретого  до  температуры  (37±0,5)°С  кальция
тромбопластина.  В  зависимости  от  техники  постановки  анализа  объемы
реагентов могут варьироваться в соответствующей пропорции.

Калибровочный график строят в полулогарифмических координатах.

По логарифмической оси абсцисс откладывают значения активности фактора