Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Рассчитывают степень гемолиза в процентах (Y

) в каждой пробирке

по формуле (2):

Aп−Ao
Aк−Ao

∙100%,

где: Ап – среднее значение оптической плотности разведений

гемолитической сыворотки;

Ао – среднее значение оптической плотности контрольных проб

без гемолиза;

Ак – среднее значение оптической плотности контрольных проб с

полным гемолизом.

Строят график, откладывая по оси ординат степень гемолиза в

процентах, а по оси абсцисс – обратные значения соответствующего
разведения гемолитической сыворотки.

Результаты титрования гемолитической сыворотки считают

достоверными,  если  максимальная  степень  гемолиза  находится  в  пределах
50–70%. Если максимальная степень гемолиза не находится в этих пределах,
титрование  повторяют  с  использованием  менее  или  более  разбавленного
раствора комплемента, соответственно.

Определяют минимальное разведение, при котором дальнейшее

повышение количества гемолитической сыворотки не вызывает
существенного повышения степени гемолиза. Это разведение определяется
как одна минимальная гемолитическая единица (1 МГЕ) в 1 мл.

В дальнейшем для приготовления суспензии сенсибилизированных

эритроцитов барана используют разведение гемолитической сыворотки,
содержащее 2 МГЕ/мл (например, если за 1 МГЕ/мл принимают разведение
1:500, то 2 МГЕ/мл – 1:250).

При проведении последующих испытаний с использованием образцов

гемолитической сыворотки той же серии можно использовать данные,
полученные ранее.

Рекомендуется определять гемолитическую активность используемой

серии гемолитической сыворотки не реже одного раза в 6 мес.