Титрование комплемента
Готовят исходное разведение комплемента (например, 1:250) с
помощью буферного раствора, затем из него готовят ряд разведений в двух
повторностях в соответствии с табл. 2:
Таблица 2 - Порядок приготовления разведений комплемента
Номера пробирок
Объем разведения комплемента
(например, 1:250), мл
Объем буферного раствора, мл
1
0,1
1,2
2
0,2
1,1
3
0,3
1,0
4
0,4
0,9
5
0,5
0,8
6
0,6
0,7
7
0,7
0,6
8
0,8
0,5
9
0,9
0,4
10
1,0
0,3
11
1,1
0,2
12
1,2
0,1
Для приготовления контрольных проб без гемолиза в три пробирки
вносят по 1,3 мл буферного раствора.
Для приготовления контрольных проб с полным гемолизом в три
пробирки вносят по 1,3 мл воды очищенной.
Затем в каждую пробирку (с разведениями комплемента пробирки 1-12
и контрольными пробами) добавляют по 0,2 мл гемолитической системы
(состоит из суспензии эритроцитов барана и гемолитической сыворотки),
тщательно перемешивают и инкубируют в термостате при температуре
37±0,5
°
С в течение 60 мин; затем охлаждают 10 мин при температуре 5±3
°
С и
центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин.
Предыдущая < | 3175 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF