Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Определение антикомплементарной активности испытуемого

образца иммуноглобулина

Проверяют

рН

испытуемого

образца

иммуноглобулина

потенциометрическим  методом  в  соответствии  с  ОФС  «Ионометрия».  При
рН  менее  7,0  его  доводят  до  значений  7,0-7,3  с  помощью  0,1М  раствора
натрия  гидроксида  (если  нет  иных  указаний  в  фармакопейной  статье).
Определяют  содержание  белка  в  испытуемом  образце  иммуноглобулина
колориметрическим методом с биуретовым реактивом в соответствии с ОФС
«Количественное  определение  белка  колориметрическим  методом  с
биуретовым  реактивом  в  препаратах  крови  человека  и  животных».  Готовят
пробу испытуемого образца иммуноглобулина, в зависимости от содержания
белка.  Например,  при  содержании  белка  в  испытуемом  образце
иммуноглобулина 50 мг/мл, к 0,2 мл раствора иммуноглобулина добавляют
0,6  мл  буферного  раствора.  Если  содержание  белка  в  испытуемом  образце
иммуноглобулина отличается от 50 мг/мл, используют большие или меньшие
объемы испытуемого образца иммуноглобулина. Точный объем испытуемого
образца иммуноглобулина (V) в мл рассчитывают по формуле (5):

V =

50∙0

где: 50 – необходимое содержание белка в испытуемом образце

иммуноглобулина, мг/мл;

0,2 – объем испытуемого образца иммуноглобулина, взятый для

испытания, мл;
С – фактическое содержание белка в испытуемом образце

иммуноглобулина, мг/мл.

Объем пробы доводят буферным раствором до 0,8 мл.
Подготовку положительного и отрицательного контролей с

использованием стандартного образца иммуноглобулина человека (BRP или
аналогичного) проводят в соответствии с инструкцией по его применению.

Для приготовления пробы с контролем комплемента в пробирку вносят

0,8 мл буферного раствора.