Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

по методу Аппельмана от 10

- 1

до 10

-8

(10

-9

или выше,

в зависимости от

специфической направленности бактериофага). Затем смешивают 1 мл
разведенного фага из пробирок с разведениями 10

-6

, 10

-7

, 10

-8

разведений с 5

мл расплавленного и остуженного до температуры 45 °С 0,7 %
мясопептонного агара. Затем добавляют (0,2

0,05) мл 18-часовой бульонной

культуры  посевного  штамма,  подготовленного  из  суточной  культуры,
выращенной на плотной питательной среде, в соответствии с требованиями к
производственным бактериальным штаммам. Содержимое пробирок быстро
перемешивают   вращением пробирок между ладонями, чтобы не произошло
застывания  агара,  и  выливают  вторым  слоем  на  поверхность  1,5  %  агара  в
чашках Петри. После застывания верхнего слоя агара чашки инкубируют в
течение  18  ч  при  температуре  (37

1) °С. Для определения концентрации

фаговых  частиц  в  маточном  фаге  подсчитывают  количество  негативных
колоний (прозрачные пятна на матовом фоне глубинного роста бактерий) в
каждой  чашке,  умножают  на  коэффициент  разведения  фага  в  пробирке  с
соответствующим  разведением.  Затем  вычисляют  среднее  значение  3
определений.

Данная методика используется при отборе перспективных фаговых рас

в коллекцию маточных бактериофагов. От вида бактериофагов зависит
порядок применяемых в опыте разведений.

рН.

Показатель pH фаголизата должен составлять от 6,6 до 7,8.

Испытание проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС
«Ионометрия».

Стерильность.

Очищенный и концентрированный фильтрат

фаголизатов должен быть стерильным. Испытание проводят в соответствии с
ОФС «Стерильность».

Аномальная токсичность.

Введение мышам очищенного фильтрата

фаголизатов не должно вызывать гибель животных. Определение проводят в
соответствии с ОФС «Аномальная токсичность». Тест-доза препарата
бактериофага в объеме 1 мл вводится животным подкожно.