Визуальный учет активности интерферона
производится микроскопи-
чески при 100-кратном увеличении через 24-48 ч после внесения индикаторного
вируса. За титр интерферона принимают величину, обратную разведению препа-
рата, при котором клеточная культура в 50 % лунок полностью защищена от ци-
топатического действия вируса.
Титр интерферона вычисляют методом Спирмена-Кербера по формуле:
−
•
+
=
2
max
50
2
log
n
p
n
d
D
ED
,
где:
D
max
– двоичный логарифм
разведения, ниже которого произошла
100 % защита (
−
);
d
−
двоичный логарифм
интервала между разведениями (=1,0);
n
−
число лунок на каждую дозу (=4);
р
−
число лунок, давших защиту (
−
) в разведении, ниже которого про-
изошла 100 % защита, и последующих разведениях.
Противовирусную активность интерферона (А
х
) в исследуемом образце
в МЕ вычисляют по формуле:
X
CO
CO
X
a
a
A
A
•
=
,
где: А
со
−
противовирусная активность СО интерферона в МЕ;
а
х
−
титр ИП;
а
со
−
титр СО.
Инструментальный учет активности интерферона
предполагает
селективное окрашивание живых клеток, защищенных интерфероном от
действия вируса, элюирование красителя, фотометрирование оптической
плотности элюата и статистическую обработку результатов с помощью
метода параллельных линий.
Как правило, результаты исследования снижения цитопатического
эффекта соответствуют сигмоидальному графику доза-ответ: зависимость
Предыдущая < | 2746 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF