Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Разведение Объем вно-

симого I

разведения

вакцины,

мл

Объем

вносимого

растворите

ля, мл

Кратность

разведений

исходной

вакцины

(в 0,5 мл)

Иммунизирующая доза в

объеме 0,5 мл

Количество

исходной

вакцины, мл

Количество

МЕ

(предполага

емое

содержание)

1:28

0,0357

0,5

2,5

10,0

1:140

0,0071

0,1

III

0,5

12,0

1:700

0,00142

0,02

Каждой мыши в каждой группе внутрибрюшинно вводят по 0,5 мл

одного из разведений испытуемой вакцины или референс-препарата. К
моменту введения заражающей дозы не менее 94 % иммунизированных
мышей должно остаться в живых и без признаков заболевания. Если гибель
животных превышает указанную величину, то опыт не подлежит учету.

Приготовление заражающей суспензии тест-штамма

B. рertussis

18323

Бактериальную суспензию

B. pertussis

18323, используемую для

заражения, готовят из 20

−

24-часовой культуры второго–третьего пассажа,

выращенной на среде Борде-Жангу, с кровью человека или КУА с кровью
человека или на других, адаптированных к коклюшному микробу средах.

Выросшую культуру контролируют путем микроскопии мазков,

окрашенных по Граму. Микробные клетки

B. рertussis 18323

должны быть

морфологически

однородны.

Посторонняя

микрофлора

должна

отсутствовать.

Готовят

бактериальную

суспензию

микробных

клеток

концентрацией, соответствующей 10 МЕ по стандартному образцу мутности
(разведение 1

). Все дальнейшие разведения микробной суспензии делают в

1% растворе гидролизата казеина, содержащего 0,6% раствор натрия
хлорида, рН (7,1±0,2).

Полученную суспензию разводят последовательно так, чтобы получить

заражающую дозу, содержащую 100000 микробных клеток (рабочая
суспензия) в объеме 0,03 мл (100–1000 LD

) . Из рабочей суспензии готовят