(определение  LD

50 

культуры) 

 

из  этой  же  партии  животных  формируют  4 

группы по 10 мышей в каждой.  

Необходимо соблюдать принцип случайного распределения животных 

по группам, случайными должны быть и расположение клеток на полках, и 
порядок введения разрешающей дозы.  

Иммунизация мышей 

Готовят  по  3  пятикратных  разведения  испытуемого  и  референс-

препаратов.  В  качестве  растворителя  используют  0,9  %  раствор  натрия 
хлорида,  рН  (7,1  ±  0,2).  В  интервале  используемых  разведений  каждого 
образца должна содержаться средняя эффективная доза ЕD

50

.  

В  ампулу  с  референс-препаратом  вносят  стерильный  растворитель

 

из 

такого расчета, чтобы в 1 мл содержалась 1 МЕ (разведение I). Из разведения 
I делают 2 последующих пятикратных разведения по схеме (табл. 1). 

Таблица 1–

 Пример разведения референс-препарата

 

Разведение 

Объем 

вносимого 

разведения I 

референс-

препарата, мл 

Объем 

вносимого 

растворителя, 

мл 

Разведения 

референс-

препарата (в 

0,5 мл) 

Иммунизирующая доза– 

0,5мл 

Количество 

исходного 

референс-

препарата, мл 

Количество 

МЕ 

I 

15 

0 

1:60 

0,0167 

0,5 

II 

2,5 

10,0 

1:300 

0,0033 

0,1 

III 

0,5 

12,0 

1:1500 

0,00066 

0,02 

 

Образец  испытуемой  вакцины  разводят  в  14  раз  (разведение  I).  Из 

разведения I делают 2 последующих пятикратных разведения по схеме (табл. 
2).  Если  полученное  в  опыте  значение  ЕD

50 

испытуемой  вакцины  будет 

больше  значений  использованных  доз,  необходимо  изменить  разведение  I 
(например,  1:10).  Последующие  2  разведения  делают  по  вышеприведенной 
схеме.   

Приготовленные разведения вакцины и референс-препарата хранят при 

температуре от 2 до 8 ºС и используют в течение не более 4 ч.  

Таблица 2

 – Пример разведения испытуемой вакцины 

Предыдущая <  | 2764  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF