Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

требования.

1.Испытание контрольной клеточной культуры
1.1.Исследование в клеточных культурах

Испытанию подвергается не менее 500 мл незараженной клеточной

суспензии в концентрации, используемой для посева клеточных культур-
продуцентов вакцины.

Отобранную в качестве контрольной клеточную суспензию разливают

во  флаконы,  клетки  оставляют  незараженными  и  инкубируют  в  тех  же
условиях,  что  и  клетки,  используемые  для  производства  вакцины.  За
контрольной клеточной культурой наблюдают до времени последнего сбора
вирусов  с  культур-продуцентов  вакцины,  но  не  менее  14  сут.  В  конце
периода наблюдения все флаконы с контрольными клеточными культурами
исследуют  с  помощью  светового  микроскопа  на  наличие  цитопатических
изменений.  Во  время  культивирования  контрольных  клеток  не  должно
выявляться признаков специфической дегенерации.

По истечении срока наблюдения (после изучения монослоя под

микроскопом) не менее 25 % контрольных клеточных культур проверяют на
наличие феномена гемадсорбции с 0,25 % эритроцитами морской свинки, кур
и  человека  I(0)  группы,  если  нет  других  указаний  в  нормативной
документации.  Материал  инкубируют  в  течение  30  мин  сначала  при
температуре  от  2  до  8  °С,  а  затем  при  температуре  от  20  до  25  °С.  Взвесь
эритроцитов  сливают,  клеточный  монослой  трижды  отмывают  раствором
Хенкса  или  0,9  %  раствором  натрия  хлорида  и  просматривают  под
микроскопом на наличие гемадсорбции.

Из оставшихся флаконов с контрольными культурами отбирают по 10

мл  культуральной  жидкости.  Если  на  протяжении  срока  инкубации
контрольных  культур  производят  сливы  вируссодержащей  жидкости  из
производственных  культур,  то  в  те  же  сроки  берут  пробы  культуральной
жидкости  из  флаконов  с  контрольными  культурами  и  сохраняют  их  при
температуре  не  выше  минус  20  °С.  В  конце  наблюдения  пробы